苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的，回答下列为题：

（1）酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，在酵母菌细胞的______中进行，其产物乙醇与重铬酸钾试剂反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验：过程③在酵母菌细胞的_______________中进行，与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度______________。
（2）第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，根据醋酸杆菌的呼吸作用类型，该过程需要在_______________条件下才能完成。
（3）在生产过程中，第一阶段和第二阶段的发酵温度不同，第一阶段的温度_____________（填“低于”或“高于”）第二阶段。
（4）醋酸杆菌属于_____________核生物，其细胞结构中_____________（填“含有”或“不含有”）线粒体。

食品、化工、医药等领域都需要广泛应用酶参与化学反应。请回答下列相关问题：
（1）酶在化学反应中的作用机制是________，细胞内的多数酶是在________上合成的。________技术适应于工业化生产的需要，便于在反应结束后对酶进行回收。
（2）将酶固定化常采用的方法是______和______。采用固定化细胞时无须将酶从细胞内提取出来，这样可以减少酶活性的损失。常用的固定化细胞方法是___________。
（3）实验操作中，固定化微生物细胞常用的载体有_________（答出1点即可），这些载体具有_________（答出1点即可）的特性。

纤维素是植物秸秆的主要成分，可利用纤维素酶将其降解为葡萄糖，随后生产燃料酒精。某科研人员将纤维素酶用海藻酸钠固定，形成凝胶小球，使它可以重复、稳定使用，提高了利用率。请回答下列问题：
（1）用海藻酸钠固定纤维素酶的方法称为______法，在溶化海藻酸钠时要求是_________。
（2）该科研人员将纤维素酶和海藻酸钠混合后，滴加到一定浓度的氯化钙溶液中。其中，氯化钙的作用是_______。若得到的凝胶小球中纤维素酶量少，原因可能是_________。
（3）该科研人员进一步“探究纤维素酶固定化后的热稳定性变化”。将固定化酶和游离酶置于60℃水浴中，每20min测定其活力一次，结果如图所示。酶活力（U）的表示可用单位时间内_____表示，据图分析可知纤维素酶固定后热稳定性_______。根据游离酶的热稳定性，推测适宜在_____条件下保存酶。

（4）纤维素酶也被广泛应用于洗涤剂，在用含纤维素酶的洗衣粉洗涤棉麻织物时，纤维素酶的作用是_______。

关于固定化酶中用到的反应柱理解正确的是( )

A．反应物和酶均可自由通过反应柱

B．反应物和酶均不能通过反应柱

C．反应物能通过，酶不能通过

D．反应物不能通过，酶能通过

下列关于酶的分离提纯和固定化技术的叙述中，不合理的是（　　）

A．分离中可以加入硫酸按使蛋白酶沉淀

B．提纯方法是使酶和承载物交联在一起

C．固定后的酶仍具有酶的活性

D．固定化酶能够连续利用，提高催化效率

回答下列关于酶工程的问题：
（1）制作果汁时，榨取的果汁常常较浑浊、黏度高，容易发生沉淀，因此人们利用果胶酶来解决上述问题，果胶酶的作用是分解果胶，瓦解植物的____________，使榨取果汁变得更容易，也使浑浊的果汁变得澄清。果汁中的酶很难回收，不能被再次利用，生产成本较高；同时，反应后酶会混在产物中，可能影响产品质量，而利用____________技术可以做到酶的反复使用。酶是由细胞产生的，于是，人们设想把合成酶的细胞直接固定用于生产，该技术的优点是_______________________。若想使固定化细胞能反复使用，实验过程中一定要避免________________________。
（2）如图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图中的X溶液的作用是_________________________。在制备海藻酸钠与酵母细胞的混合液时，应将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，才能加入已活化的酵母细胞，目的是防止________________________。

（3）为了探究某加酶洗衣粉中碱性蛋白酶含量与洗涤效果的关系，某同学通过实验获得如图2所示的结果。由图可知，加酶洗衣粉中碱性蛋白酶的最适含量是________%，本实验的自变量是____________________。

六氣苯(HCB)是一种具有长期残留和高毒性的有机污染物质，对人类健康和环境具有严重危害。科研人员通过人工筛选获得高效的HCB降解菌，将其扩大培养后投入污染土壤中，可降解土壤中的HCB。请回答下列问题：
（1）欲选择性获得能降解HCB的降解菌，应该在培养基中加入HCB为唯一碳源，除此之外，还需要加入___________等营养物质。扩大培养时,将得到的菌株接种到液体培养基中混匀后，一部分静置培养，另一部分振荡培养，结果发现:震荡培养的细菌比静置培养的降解菌生长速度___________；分析原因是___________。
（2）将筛选的HCB降解菌固定在一定的空间内定殖于土壤中能提高降解效率，固定HCB降解菌一般方法为包埋法，不使用化学结合法和物理吸附法的原因是___________。用于包埋HCB降解菌的载体应该具有的特点是___________。(试举2个特点)
（3）研究人员从HCB降解菌中分离出HCB降解酶，分离该降解酶的常用方法有凝胶色谱法和___________。凝胶色谱法分离蛋白质时相对分子质量___________的蛋白质先从层析柱中洗脱出来，原因是___________。
（4）HCB降解菌在－20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的___________。(填“蒸馏水”甘油”或“碳酸钙”)

请回答相关果酒制作及固定化细胞的问题。
（1）在葡萄酒的自然发酵过程中，菌种的主要是附着在葡萄皮上的___________。为提高果酒的品质，可以直接在果汁中加入人工培养的纯净酵母菌。要筛选得到纯净的酵母菌种，通常使用的培养基按功能来分称为________培养基。酒精发酵时一般将温度控制在_______________。
（2）为提高果汁的出汁率及使果汁变得澄清，在果汁生产中常用到___________。
（3）利用果汁可以酿制果酒，现为提高果酒的品质及节约生产成本，某厂家已尝试使用固定化细胞技术。在制备固定化酵母细胞时，常采用下图中的方法[    ]________(填出序号及名称)。采用该方法的原因是____________________。

（4）制作固定化酵母细胞时，要将已冷却至室温的溶化好的海藻酸钠溶液与已_____的酵母细胞充分搅拌，经充分混合均匀的酵母细胞溶液可在饱和_________溶液中形成凝胶珠。如果得到的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明_______________。

苹果是常见水果、口感好、营养价值高，广受人们喜爱，但其收获的季节性强，易造成积压滞销，腐烂变质。某市为缓解产销矛盾，提高产品的附加值，利用苹果生产果汁、果酒和果醋，大致工艺流程如下图。请分析回答：

（1）果酒发酵初期先通入适量空气的目的是____________________，果酒发酵之后进行果醋发酵，需要改变的条件包括____________________________（写出2点），当氧气和糖分充足时，发生的主要物质转化是__________________________。
（2）在苹果汁的生产过程中，需要加入果胶酶，目的是_____________________________。
（3）为使酵母菌能反复利用，常用______________法固定酵母细胞；实验研究表明使用固定化酵母进行发酵的酒精产量平均值明显高于使用游离酵母进行发酵的对照组，可能的原因是_________________。

请回答下列有关固定化酶与固定化细胞的问题：
（1）与固定化酶技术相比，固定化细胞固定的是_________。在实际生产中，固定化酶技术的优点是_________。制备固定化酵母细胞时使用的方法是_________（填下图序号）。

（2）在缺水状态下，微生物处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复_________状态。活化前应选择足够大的容器，因为酵母细胞活化时________________。
（3）将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至_________后，再加入酵母菌。如果海藻酸钠溶液浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目_________。固定化细胞一般采用包埋法，原因是________________________。