生物技术实践与人们生产和生活密切相关。回答下列有关问题：
（1）无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌污染。常用的灭菌方法有________________(答三种方法）。
（2）在生产葡萄酒的过程中，发现葡萄酒变酸，表面观察到菌膜，造成此现象的生物是________________。腐乳外部有一层致密的“皮”,这是________________的匍匐菌丝形成的。
（3）在制作果醋过程中，榨取的果汁非常浑浊，解决方法是_______________________________。
（4）提取洋葱DNA时，要在切碎的洋葱中加入一定的________________，并进行充分地搅拌和研磨，待过滤后再收集研磨液。
（5）橘皮精油的提取方法不采取水中蒸馏法，是因为该方法会导致_______________等问题。

加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉。请回答下列问题：

表一
脸盆 编号	洗涤物 (等量)	洗涤 温度	洗衣粉 (等量)	水 量	洗净所 需时间
1	油污布	45℃	加酶	2L	4min
2	油污布	45℃	普通	2L	7min
3	油污布	5℃	加酶	2L	9min
4	油污布	5℃	普通	2L	8min

 

（1）该实验应控制的无关变量有______（写出两项即可）。50℃时加酶洗衣粉中碱性蛋白酶的最适含量是______。
（2）表一是添加脂肪酶的加酶洗衣粉和普通洗衣粉洗涤效果的实验记录，请据表回答问题：①该实验设计体现了______原则。
②若实验组1号洗净所需时间接近7min，最可能的原因是______。
（3）根据以上实验结果，写出两项提高加酶洗衣粉洗涤效果的措施：______、______。

表二
温度/℃	20	30	40	45	50	60
普通洗衣粉去污力/﹪	15	18	20	21	21.5	22
加酶洗衣粉去污力/﹪	30	40	48	50	48	37

 
（4）表二是围绕加酶洗衣粉的一项研究结果，分析上述实验结果可以得出的结论是：
①______； ②______。

酶是细胞合成的生物催化剂。请回答下列有关酶的应用的问题：
(1)在制作果汁时，为提高出汁率并使果汁变澄清，要使用果胶酶。该酶最常从________中提取用于工业生产。该酶作用后的产物是___________。在进行酶处理之前，需要对水果进行_________处理。
(2)酶的活性受温度和pH的影响，探索温度对淀粉酶活性的影响实验，需要进行如下步骤：
①取3支试管，各注入2ml淀粉溶液并分别编号A、B、C；
②再取3支试管，各注入lml淀粉酶溶液并分别编号a、b、c；
③向A、B、C试管各滴1滴碘液；
④将A、a试管放在60℃的热水中，B、b放在沸水中，C、c放在冰水中，各维持温度5min；
⑤将对应混合的3支试管分别放在60℃的热水、沸水和冰水中维持温度5min；⑥观察实验现象。最合理的操作顺序是：_____。

A．①→②→③→④→⑤→⑥	B．①→②→④→⑤→③→⑥
C．①→④→②→③→⑤→⑥	D．①→②→⑤→④→③→⑥

(3)加酶洗衣粉中包裹酶是水溶性的特殊化学物质，若存放时间过长会导致_________。

图1为利用苹果制备果汁、果酒、果醋的流程图。

（1）苹果汁的制作中可利用果胶酶提高出汁率，果胶酶可以从黑曲霉、______等微生物中获得。利用苹果酒制作苹果醋所需的微生物是______。
（2）酶在水溶液中很不稳定，且不利于工业化使用，常用固定化技术使之成为______而又有酶活性的制剂。图2是澄清苹果汁生产实验示意图，下列相关叙述中，正确的是______。

A．实验中所用的固定化果胶酶吸附后可永久使用

B．为防止杂菌污染，图示装置制作完毕后需瞬间高温灭菌

C．通过控制阀调节苹果汁流出的速率，保证反应充分进行

D．固定化果胶酶不可重复使用，每次生产前需重新装填反应柱

（3）图中①过程为获得酒精含量和糖含量较高的苹果酒，需向果汁中添加______。
（4）由图中①转变为②，除改变温度、调节pH外，还需调整的发酵条件是______。

为了进一步增强洗衣粉对血渍、奶渍、油污、土豆泥等衣物上常见污垢的去除能力，洗衣粉中常常会添加各种酶类。请回答有关问题：
（1）根据衣物上常见的污垢，加酶洗衣粉中添加的酶类有碱性蛋白酶、____________。
（2）碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的 __________。
（3）加酶洗衣粉的包装袋上的产品说明：水温以30~50℃为宜，切忌用70℃以上的热水。根据你所学习的有关知识，解释此注意事项： _____________________  。
（4）下面是有关加酶洗衣粉洗涤效果的探究实验，请据表回答：

脸盆编号	洗涤物 (等量)	洗涤 温度	洗衣粉 (等量)	水量	洗净所需 时间
L	油污布	45℃	加酶	2 L	4 min
2	油污布	45℃	普通	2 L	7 min
3	油污布	5℃	加酶	2 L	9 min
4	油污布	5℃	普通	2 L	8 min

 
①该实验设计体现了 _________ 、_________原则。
②该实验设计中的自变量是_______________、_______________。
③若1号实验组洗净所需时间接近7分钟，请分析最可能的原因_________。

回答下列问题：
（1）酶活性是指酶催化一定化学反应的能力，酶活性的高低可以用在一定条件下，酶所催化某一反应的___________来表示。与一般酶制剂相比，固定化酶的突出优点是既能与反应物___________，又能与产物___________，还能被反复利用。
（2）探索温度对淀粉酶活性的影响实验，需要进行如下步骤：
①取3支试管，各注人2ml淀粉溶液并分别编号A、B、C
②再取3支试管，各注人1m1淀粉酶溶液并分别编号a、b、c
③向3支试管各滴1滴碘液
④将A、a试管放在60℃的热水中，B、b放在沸水中，C、c放在冰水中，各维持温度5min
⑤分别将A与a、B与b、C与c混合后，再依次放在60℃的热水、沸水和冰水中维持温度5min
⑥观察实验现象
最合理的操作顺序是（________）

A．①②③④⑤⑥	B．①②④⑤③⑥
C．①④②③⑤⑥	D．①②⑤④③⑥

（3）酒精发酵过程相关的酶存在于酵母菌细胞的___________中。
（4）纤维素分解菌因能产纤维素酶而广泛存在，纤维素酶是一种复合酶，在三种酶的___________作用下，纤维素被分解成葡萄糖。在以纤维素为唯一碳源的培养基上培养一段时间后，培养基表面形成多个单菌落，但不同菌株分解能力有差异，为选出高效分解的菌株，请利用所学知识，写出具体思路：______________________。

下列有关现代生物技术的叙述中，不正确的是

A．运用固定化酶和固定化细胞进行生产时，都需要为其提供营养物质

B．果酒和果醋制作中利用的微生物，结构上主要差别在于有无核膜

C．采用稀释平板法和平板划线法都能分离纯化菌种，得到单细胞菌落

D．探究加酶洗衣粉的最适温度时，洗衣粉量、污渍的种类属于无关变量

下列关于酶技术应用的叙述，正确的是（  ）

A．用包埋法将果胶酶固定化后，其活性明显增强

B．尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用

C．较长时间保持酶活性，各种酶制剂都应保存在低温的条件下

D．加酶洗衣粉中加入表面活性剂，其目的是促进酶的活性

酶工程应用的千余种商品酶，大多数是利用下列哪种方法生产的？（ ）

A．微生物发酵

B．动物细胞培养

C．植物细胞培养

D．人工合成

酵母菌是真核生物，在人类文明史中被应用的最早的微生物，现今被广泛应用于人们的生活和生产中。请回答下列与酵母菌有关的问题：
(1)在测定土壤中微生物的数量时，酵母菌选用10²、10³、10⁴倍的稀释液进行平板培养，而细菌一般用10⁴、10⁵、10⁶倍的稀释液进行，原因是________________________。纯化的菌株如需短时间保存则将菌种接种到_________________培养基上，并置于4℃冰箱保存。
(2)制备固定化酵母细胞的实验步骤是：酵母细胞的活化→配制CaCl₂溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。
①影响实验成败的关键步骤是_____________________________________。观察形成凝胶珠的颜色和形状，如果颜色过浅，说明_____________________________。实验中CaCl₂溶液的作用是___________________________________________________。
②固定酵母细胞的方法属于_____________________法，一般固定酶时不采用这种方法，原因是_____________