民间传统酒曲中含有大量的微生物，现进行下述实验分离酒曲中的主要微生物。
实验一：将酒曲制成悬液后，分别取不同稀释度的酒曲悬液接种到GPDA培养基上，经培养后根据每个平板的菌落特征，统计不同微生物的菌落数，发现酒曲中主要有两类微生物，即酵母菌和霉菌。
（1）上述操作过程中的接种方法是______________。
（2）根据菌落特征鉴别微生物时，能够观察的菌落特征有_____________。

A．形状

B．颜色

C．隆起程度

D．大小

实验二：在液体中，酵母菌比霉菌生长快；而酸性培养基中酵母菌比细菌生长更适宜。下述方案将酵母菌从酒曲中进行了分离。用小刀切开曲块，挖取米粒大小一块投入酸性蔗糖豆芽汁培养液中，然后置于25℃培养箱中培养两天。
（1）酸性蔗糖豆芽汁培养液的成分包括黄豆芽、蔗糖、乳酸和水，其中碳源物质主要是___
（2）上述实验操作中，需要灭菌的有_______________________。
实验三：取浑浊的培养液1mL转接到另一瓶酸性蔗糖豆芽汁培养液中并培养，如此重复多次。多次转接后，取稀释液用图所示方法接种在蔗糖豆芽汁平板上。

（1）图中所用接种方法是____________________。
（2）与酸性蔗糖豆芽汁培养液成分相比，蔗糖豆芽汁平板培养基中少了乳酸，多了琼脂。这种成分改变的原因是：_________________________________________________________

为获得果胶酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作。
（1）为分离果胶酶产生菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是________。制备的培养基常用____________法进行灭菌。

K2HPO4	MgSO4	NaNO3	FeSO4	琼脂
0．1g	0．5g	3g	0．01g	2g	15g	加至1L

 
（2）科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中，震荡混匀，制成悬液。为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行__________,用________法接种于固体培养基上。接种后的培养基______状态放入培养箱。
（3）选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液（果胶与刚果红结合后显红色），一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落和_________直径的比值，筛选果胶酶高产菌株。
（4）将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的___________（填“上清液”或“沉淀物”）获得粗提的果胶酶。将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性。进行吸光值测定时，需将____________与等量果胶溶液混合，作为实验的对照。

微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。下列关于这两种接种方法的叙述中，不正确的是

A．都只能用于固体培养基接种	B．都能用于微生物的计数
C．接种培养后均可获得单菌落	D．接种工具使用后需要灭菌

下列有关微生物培养的叙述中，不正确的是（）

A．获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染

B．单菌落的分离是消除污染杂菌的通用方法

C．培养基都必须使用高压蒸汽灭菌法灭菌

D．倒置平板防止培养皿盖上的冷凝水滴落

回答下列（一）（二）小题：
（一）柑橘汁在国内外市场上是最受人们欢迎的饮料之一。其大致的生产工艺流程如下：柑橘→选果与洗净→榨汁→过滤→果汁的调和→脱油和脱气→加热杀菌→装填和冷却。
（1）为提高柑橘的出汁率，榨汁时一般采用以下两种处理方式：一是加________处理，分解果肉组织中的果胶物质，提高出汁率；二是__________处理，使细胞原生质中的蛋白质凝固，改变了细胞的半透性，从而提高出汁率。
（2）果汁中含有3%～5%的果肉浆能给予果汁良好的色泽和浊度，但过量会使果汁粘稠化。检测柑橘汁中果肉浆含量是否合格，可采用比浊法，需要先绘制果肉浆含量与光密度值关系的______________，再通过测定样品柑橘汁的______________进行计算。
（3）工业生产中的果汁在装填之前需杀菌处理。柑橘的果汁pH一般都较低，因此杀菌时主要以______为杀菌对象。在微生物的分离、计数过程中，常采用_____________法接种，计数过程中统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为____________。
（二）从西非热带植物果实中提取的甜味蛋白质Brazzein是一种高甜度、低热值的新型非糖甜味剂。但是由于受到产地种植的限制等，难以实现Brazzein的大量生产。近几年人们引入生物工程方法获得甜味蛋白。如图是科学家培育能生产甜味蛋白质Brazzein乳腺生物反应器的过程，请回答相关问题：

（1）甜味蛋白质Brazzein基因，可采用PCR技术进行大量扩增，但前提是______________。过程①可采用动物病毒转染法，利用携带目的基因的病毒感染胚胎干细胞，实现对胚胎干细胞的__________。
（2）过程③通常从雌性小鼠的_______________中获取囊胚。过程④是将胚胎干细胞显微注射到小鼠的囊胚腔内形成嵌合体囊胚，将不同的基因转移、组合到嵌合体中，利用这一种方法可以解决________________的困难。
（3）过程⑤中要对受体小鼠进行_____________处理，得到的嵌合体小鼠的毛色为___________________。
（4）鉴定嵌合体小鼠是否成功表达甜味蛋白质Brazzein，可以利用_____________原理对小鼠乳汁中的特异性蛋白进行检测。

羽毛的成分主要是角蛋白，是一类结构稳定、不溶于水的蛋白质，目前缺乏对其高效降解的处理方法。实验人员从废弃羽毛堆积处的土壤中分离筛选出具有高效降解羽毛角蛋白的细菌，请回答下列问题：
（1）筛选高效降解羽毛角蛋白的细菌需从废弃羽毛堆积处的土壤中取样，其原因是____________。
（2）筛选高效降解羽毛角蛋白的细菌的培养基中应加入____作为唯一碳源，所用培养基从功能上来看属于_____培养基，该培养基中还需要加入适量的K₂HPO₄和KH₂PO₄，其作用是______________，对培养基灭菌的常用方法是___________________。
（3）角蛋白酶是羽毛降解菌的一种分泌蛋白，为了测定其角蛋白酶的活性，应让羽毛降解菌发酵，然后将发酵液离心，再从________（填“沉淀物”或“上清液”）取样。为了将角蛋白酶和其他蛋白质分离，可用电泳法分离蛋白质，电泳法可以根据蛋白质分子__________的不同，将蛋白质分离。测定羽毛降解菌角蛋白酶活性的主要目的是_____________。

果胶酶广泛用于食品工业、纺织品加工业和造纸工业等领域。请结合所学知识，同答下列问题：
（1）果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括_______________（至少答出2种）等。
（2）下表是筛选产果胶酶微生物时所用的一种培养基的配方：

K2HPO4	MgSO4	NaNO3	FeSO4	果胶	刚果红	水
0.1g	0.5g	3g	0.001g	2g	1g	加至1L

 
①该培养基能够筛选到产果胶酶的微生物的原因是____。为了能够筛选出分解果胶的微生物菌落，该培养基还需要添加____。
②该培养基中的刚果红可以与____形成红色复合物。我们可以通过菌落周围是否产生____来筛选产果胶酶的微生物。
（3）某果胶酶高产菌株产生的果胶酶为分子量不同的多种酶复合物，可以采取____法将这些酶在保持活性下进行有效分离。
（4）果胶酶应用于果汁生产时，主要解决的两大问题分别是：____________________。

（1）微生物培养过程中都需要培养基，微生物不同，所需要的培养基也不同。一般培养细菌的是________培养基；培养真菌的是________培养基；培养酵母菌的是____________培养基。这些培养基一般都含有________________四类物质。   
（2）植物体中含有多种有用的物质，不同物质需要用不同的方法提取，一般提取玫瑰精油用    ________法，提取橘皮精油用____________法，而胡萝卜素的提取用________法。
（3）最近引人瞩目的新冠肺炎病毒属于冠状病毒科冠状病毒属，由包膜和 RNA 组成，包膜中含有三种糖蛋白，若现在要将新冠肺炎病毒组成成分进行分离，你认为最可能用到的方法是___________。

植物组织培养实验中，为保证实验成功，需要对实验设备、用品及材料进行灭菌或消毒。下表所列的对象与方法的对应关系中，错误的是（   ）

选项	对象	方法
A	三角瓶	高压蒸汽灭菌
B	培养基	G6玻璃沙漏斗过滤
C	超净台	紫外灯照射
D	自然生长的茎段	70%的酒精和5%次氯酸钠先后浸泡

 

A．A

B．B

C．C

D．D

下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是（  ）

A．羧甲基纤维素钠因不溶于水而使培养基不透明

B．接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落

C．以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌

D．用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少