为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验。

（1）配制好的培养基灭菌通常可以使用_________法。步骤③与步骤②中培养基成分的最大区别是_______________________________。
（2）同学甲进行过程④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是___________；推测同学甲用此方法接种时出现图B结果可能的操作失误是________________；在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是____________________。
（3）同学乙也按照同学甲的接种方法进行了过程④的操作：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为________________。
（4）步骤⑤需要震荡培养其目的是提高培养液溶氧量，同时使__________，提高营养物质利用率。
（5）步骤⑤后取样测定石油含量的目的是____________________。

大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一类细菌，含有2000种以上的蛋白质；大肠杆菌的数量是检测自来水是否受粪便污染的最直接的指标。
回答下列问题：
(1)利用凝胶色谱法分离提取到的部分大肠杆菌蛋白质时，等样品完全进入凝胶层后，加入pH为7.0、浓度为20mmOl/L的________到适当高度进行洗脱，结果甲蛋白质先洗脱出来，乙蛋白质后洗脱出来，则相对分子质量较大的是______________蛋白质。
(2)通过滤膜法可以测定自来水中大肠杆菌的数目：一定体积的自来水样过滤后，将滤 膜放在伊红-美蓝培养基（主要成分包括：蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖、伊红和美蓝水溶液）上培养，大肠杆菌的代谢产物能与伊红-美蓝反应，使菌落呈黑色。根据培养基上菌落的数目，计算出大肠杆菌的数量。
①伊红-美蓝培养基属于_____(填“选择”或“鉴别”)培养基，蛋白胨的作用有_____(答出两点即可）。
②培养大肠杆菌时，在接种前通常需要检测固体培养基是否被污染，检测方法是______。
③用滤膜法进行测定时，滤膜的孔径应 _______(填“大于”或“小于”）大肠杆菌。滤膜法是根据培养基上菌落的数目来推测样品中的活菌数，其原理是___。

从自然界筛选嗜盐菌的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。
（1）培养嗜盐菌的菌样应从____________环境采集。
（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其在群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对嗜盐产淀粉酶微生物的富集培养应选择以
________为唯一碳源的培养基，并在高盐条件下培养。在富集培养过程中，需将锥形瓶放在摇床上振荡，一方面使菌株与培养液充分接触，提高营养物质的利用率；另一方面能__________。
（3）下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。

获得图A效果的接种方法是_____________。获得图B效果的接种方法是_____________，该方法在第二次划线及其后划线总是从上次划线的末端开始的原因是___________________。
（4）采用固体平板培养细菌时要倒置培养的目的是________________________________。

酵母菌是真核生物，在人类文明史中被应用的最早的微生物，现今被广泛应用于人们的生活和生产中。请回答下列与酵母菌有关的问题：
(1)在测定土壤中微生物的数量时，酵母菌选用10²、10³、10⁴倍的稀释液进行平板培养，而细菌一般用10⁴、10⁵、10⁶倍的稀释液进行，原因是________________________。纯化的菌株如需短时间保存则将菌种接种到_________________培养基上，并置于4℃冰箱保存。
(2)制备固定化酵母细胞的实验步骤是：酵母细胞的活化→配制CaCl₂溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。
①影响实验成败的关键步骤是_____________________________________。观察形成凝胶珠的颜色和形状，如果颜色过浅，说明_____________________________。实验中CaCl₂溶液的作用是___________________________________________________。
②固定酵母细胞的方法属于_____________________法，一般固定酶时不采用这种方法，原因是_____________

在涂布有大肠杆菌的培养基上进行抑菌实验，在a、b、c处分别贴浸有不同抗生素（浓度相同）的无菌滤纸片，d处滤纸片浸有无菌水。培养后的结果如下图。以下判断错误的是

A．a处抑菌效果小于b处
B．b处的滤纸片没有沥干
C．c处抗生素无效
D．d为对照

在大肠杆菌的培养与分离实验中，下列相关操作正确的是（   ）

A．在LB固体培养基配制过程中，为防止杂菌污染，需要利用无菌水进行配制

B．实验中所需的棉花应使用脱脂棉，因为脱脂棉不易吸水，可以防止杂菌污染

C．灭菌后，通常将实验用具放入40~50℃烘箱中烘干，以除去灭菌时的水分

D．倒平板应在无菌超净台进行，将培养基倒入培养皿后先置于水平桌面上，再晃动

日前微信传言手机屏幕细菌比马桶按钮上的多。两个兴趣小组分别展开如下图的实验过程。下列分析正确的是

A．通过观察菌落的形态、大小，可知手机屏幕和马桶按钮上都存在多种微生物

B．以上两组实验在接种过程中均需要用到酒精灯、接种环等

C．两组实验操作均正确且完全一致，但结果截然不同，原因可能是取样部位不同

D．该实验对照组可以设置为取相同培养基接种等量无菌水进行培养

某养鸡场出现大量疑似沙门氏菌（SM）病，利用氨苄西林、强力霉素等常用抗生素治疗后，鸡的死亡率没有明显降低。为此，研究人员开展了下列实验。请分析回答：

（1）过程①中，须将接种环进行_______处理后，从病死鸡的肝脏、小肠、盲肠等处采集内容物，接种到肉汤培养液培养24h。
（2）过程②中，将蘸取的肉汤培养液利用________法接种、培养24h后，根据_________的颜色、大小、形状等特征进行初步鉴定，挑选出基本符合沙门氏菌特征的单个菌落再接种培养备用。
（3）研究人员取定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片；分别选用多种抗生素，按照不同抗生素治疗量的比例配制药液，浸泡等量小纸片，干燥后备用；取沙门氏菌，用生理盐水制备成悬液后，取适量菌悬液均匀涂布在平皿上；取不同抗生素处理的小纸片贴在平皿上，培养24h后，测量每种小纸片周围出现的透明圈直径（mm），如下表：

药物名称	林可霉素	强力霉素	阿奇霉素	恩诺沙星	氨芐西林	头孢克洛	阿米卡星
小纸片1	6	9	7	22．5	10	15．5	20
小纸片2	11	7	5．5	19	7	10	18
小纸片3	8	8	6	26．5	9	19	21

 
在治疗沙门氏菌病时，应首选，_________种药物。
（4）为了探索治疗沙门氏菌病的新途径，研究人员选用健康的3日龄鸡，每组10只，尝试利用SDZ噬菌体进行试验，研究方案如下表：

组别	A	B	C	D
注射生理盐水（）	200	100
注射SDZ噬菌体（）		100		100
注射沙门氏菌液（）				100

 
一段时间后检测各组鸡的存活数依次为10只、10只、4只、9只。请分析：
①设置B组的目的主要是为了说明_________，C组应注射________。
②本实验说明________，且可以避免因长期使用抗生素而产生________。

研究人员从土壤中筛选得到酵母菌纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素的条件进行了研究。据图分析错误的是（   ）

A．筛选该高产菌株需要在牛肉膏蛋白胨培养基中添加纤维素

B．探究最适温度时应尽可能将发酵液的pH控制在9左右

C．该酵母菌高产菌株产生纤维素酶的最适温度是35℃

D．利用该高产菌株降解纤维素时需严格保持厌氧环境

做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是（   ）

A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖

B．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上

C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落

D．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上