肠出血性大肠杆菌是能导致人体患病的为数不多的几种大肠杆菌中的一种，人体感染该种大肠杆菌后的主要症状是出血性腹泻，感染严重者可出现溶血性尿毒综合征( HUS)，危及生命。该大肠杆菌在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色，从而形成透明圈。下图为从被肠出血性大肠杆菌污染的食物中分离和提纯该大肠杆菌的操作流程示意图。请回答下列相关问题：

（1）肉汤培养基可为培养的微生物提供的营养成分包括____。
（2）以上操作中在血平板上的接种方法是________；第一次接种操作前和整个接种操作结束后均需要对接种工具进行灼烧灭菌，其目的分别是___和____。
（3）为了进一步研究该大肠杆菌的抗原性，常利用___法分离其蛋白质，若甲蛋白质比乙蛋白质后洗脱出来，则相对分子质量较大的是____。在装填凝胶柱时，不得有气泡产生，是因为________________

下表是筛选异养型细菌的培养基配方。

(1)苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，此培养基中的成分X除为目的菌提供能源外，还能提供________，该培养基从作用看属于________培养基。制备固体培养基时调节pH在________步骤后。
(2)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，则获得图B效果的接种方法是________。运用图A所示接种方法统计的菌落常常比活菌的实际数目________。在探究“酵母菌种群数量变化”实验中，已知每个计数室由25×16个小格组成，容纳液体的总体积为0.4 mm³，观察到图中计数室所示a、b、c、d、e 5个中格共有酵母菌80个，则1 mL样液中约有酵母菌________个。

(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加________可初步鉴定该种细菌能够分解尿素，原理用方程式表示为________________________；在筛选能够分解纤维素的微生物过程中，常用到________染色法。在培养基灭菌后倒平板前以________比例加入染液，这种鉴定方法的的不足是__________________。
(4)培养基通常用__________法灭菌，若无条件，也可用间隙灭菌法。其程序是：第一天，将培养基在100 ℃下维持30 min，然后在36～37 ℃下放置24 h；之后重复前面的操作2-3次。请分析：
①培养基在100 ℃下维持30 min的目的是______。
②在36～37 ℃下放置24 h后再加热的目的是__________。
③怎样证明间隙灭菌法的效果？ ________。

在生物实验中经常涉及酒精，下列相关实验中关于酒精的描述，错误的是（  ）

A．在微生物实验室培养中，常用酒精对操作者双手消毒

B．鉴定脂肪实验中，使用酒精是为了改变细胞膜的透性

C．在色素的提取和分离实验中，用无水酒精溶解色素

D．在探究酵母菌的呼吸方式的实验中，用橙色重铬酸钾溶液鉴定酒精的生成

研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用，两者的提取及应用如下图所示。

(1) 柚皮易焦煳，宜采用________法提取柚皮精油，新鲜的柚皮干燥去水并用________浸泡处理，该过程得到的糊状液体可通过________除去其中的固体杂质。
(2) 培养基中的尿素和牛肉膏可为乳酸菌A生长提供________。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其相对分子质量越大，电泳速度________。
(3) 做抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

(4) 柚皮油也可以用萃取法来提取，原因是__________________，分析上图，提高萃取效果的方法是__________________、__________________。

为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验。

（1）配制好的培养基灭菌通常可以使用_________法。步骤③与步骤②中培养基成分的最大区别是_______________________________。
（2）同学甲进行过程④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是___________；推测同学甲用此方法接种时出现图B结果可能的操作失误是________________；在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是____________________。
（3）同学乙也按照同学甲的接种方法进行了过程④的操作：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为________________。
（4）步骤⑤需要震荡培养其目的是提高培养液溶氧量，同时使__________，提高营养物质利用率。
（5）步骤⑤后取样测定石油含量的目的是____________________。