下图是科研人员用海藻酸钠固定双歧杆菌并研究固定后双歧杆菌繁殖能力的过程，相关叙述正确的是（   ）

①密封培养  ②固定化　③密封培养④溶解凝胶珠　⑤

A．步骤①的主要目的是获得代谢旺盛的双歧杆菌

B．步骤②需控制凝胶珠在NaCl溶液中的浸泡时间

C．步骤③中应该用等量的游离的双歧杆菌做对照培养

D．步骤⑤可利用稀释涂布平板法接种双歧杆菌并计数

羽毛的成分主要是角蛋白，是一类结构稳定、不溶于水的蛋白质，目前缺乏对其高效降解的处理方法。实验人员从废弃羽毛堆积处的土壤中分离筛选出具有高效降解羽毛角蛋白的细菌，请回答下列问题：
（1）筛选高效降解羽毛角蛋白的细菌需从废弃羽毛堆积处的土壤中取样，其原因是____________。
（2）筛选高效降解羽毛角蛋白的细菌的培养基中应加入____作为唯一碳源，所用培养基从功能上来看属于_____培养基，该培养基中还需要加入适量的K₂HPO₄和KH₂PO₄，其作用是______________，对培养基灭菌的常用方法是___________________。
（3）角蛋白酶是羽毛降解菌的一种分泌蛋白，为了测定其角蛋白酶的活性，应让羽毛降解菌发酵，然后将发酵液离心，再从________（填“沉淀物”或“上清液”）取样。为了将角蛋白酶和其他蛋白质分离，可用电泳法分离蛋白质，电泳法可以根据蛋白质分子__________的不同，将蛋白质分离。测定羽毛降解菌角蛋白酶活性的主要目的是_____________。

为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验。

（1）配制好的培养基灭菌通常可以使用_________法。步骤③与步骤②中培养基成分的最大区别是_______________________________。
（2）同学甲进行过程④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是___________；推测同学甲用此方法接种时出现图B结果可能的操作失误是________________；在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是____________________。
（3）同学乙也按照同学甲的接种方法进行了过程④的操作：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为________________。
（4）步骤⑤需要震荡培养其目的是提高培养液溶氧量，同时使__________，提高营养物质利用率。
（5）步骤⑤后取样测定石油含量的目的是____________________。

嗜热链球菌属于一种乳酸菌。分离出优质的嗜热链球菌是酸奶工业中的关键环节，以下是嗜热链球菌的有关分离纯化与鉴定过程，请回答相关问题。
第一步：从国家乳业技术中心获得混合发酵剂（含多种乳酸菌），用无菌生理盐水梯度稀释。
第二步：取等量不同稀释度的菌液分别接种于Elliker培养基，在相同且适宜条件下培养。
第三步：选取疑似菌落分别穿刺接种于ABC三种糖发酵半固体培养基（成分及现象如下表）中培养，进一步进行生化鉴定。

成分（g）	胰蛋白胨	牛肉膏	葡萄糖	蔗糖	麦芽糖	溴甲酚紫	NaCl	琼脂	现象
A培养基	10	3.0	5.0	无	无	0.04	5.0	5.0	紫色变为黄色
B培养基			无	5.0	无				紫色变为黄色
C培养基			无	无	5.0				不变色
说明	1.溴甲酚紫是一种酸碱指示剂，在中性时为紫色，碱性时为深红色，而在酸性时呈现黄色。 2.将上述成分溶解，pH调为7，用蒸馏水定容至1000mL；

 
第四步：将生化鉴定为嗜热链球菌的疑似菌落进行扩大培养并保存。
（1）第一步中稀释的目的是______________________。
（2）在第二步中，利用的接种方法是____________，可根据菌落__________特征来选取疑似菌落。（写出两点）
（3）第三步中，如果接种的疑似菌落确实是嗜热链球菌，根据生化鉴定现象归纳其代谢特点为：利用___（葡萄糖/蔗糖/麦芽糖）作为主要碳源，并可以经_____（无氧/有氧）呼吸的方式分解底物，且在代谢产物中一定有____（酸/碱/中）性产物产生。NaCl的主要作用是_________。
（4）第四步中，如果要长期保存分离出的菌种常采用___________________的方法，并将其置于_____ ℃ 冷冻箱中保存。

下列有关使用高压蒸汽灭菌锅的操作，错误的是(　　)

A．加水时，水面应与三角搁架平齐

B．加盖时，将排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内

C．加热时，待冷空气完全排尽后关上排气阀

D．切断电源后，打开排气阀使压力表降到零后开盖