为获得果胶酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作。
（1）为分离果胶酶产生菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是________。制备的培养基常用____________法进行灭菌。

K2HPO4	MgSO4	NaNO3	FeSO4	琼脂
0．1g	0．5g	3g	0．01g	2g	15g	加至1L

 
（2）科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中，震荡混匀，制成悬液。为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行__________,用________法接种于固体培养基上。接种后的培养基______状态放入培养箱。
（3）选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液（果胶与刚果红结合后显红色），一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落和_________直径的比值，筛选果胶酶高产菌株。
（4）将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的___________（填“上清液”或“沉淀物”）获得粗提的果胶酶。将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性。进行吸光值测定时，需将____________与等量果胶溶液混合，作为实验的对照。

微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。下列关于这两种接种方法的叙述中，不正确的是

A．都只能用于固体培养基接种	B．都能用于微生物的计数
C．接种培养后均可获得单菌落	D．接种工具使用后需要灭菌

回答下列（一）（二）小题：
（一）柑橘汁在国内外市场上是最受人们欢迎的饮料之一。其大致的生产工艺流程如下：柑橘→选果与洗净→榨汁→过滤→果汁的调和→脱油和脱气→加热杀菌→装填和冷却。
（1）为提高柑橘的出汁率，榨汁时一般采用以下两种处理方式：一是加________处理，分解果肉组织中的果胶物质，提高出汁率；二是__________处理，使细胞原生质中的蛋白质凝固，改变了细胞的半透性，从而提高出汁率。
（2）果汁中含有3%～5%的果肉浆能给予果汁良好的色泽和浊度，但过量会使果汁粘稠化。检测柑橘汁中果肉浆含量是否合格，可采用比浊法，需要先绘制果肉浆含量与光密度值关系的______________，再通过测定样品柑橘汁的______________进行计算。
（3）工业生产中的果汁在装填之前需杀菌处理。柑橘的果汁pH一般都较低，因此杀菌时主要以______为杀菌对象。在微生物的分离、计数过程中，常采用_____________法接种，计数过程中统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为____________。
（二）从西非热带植物果实中提取的甜味蛋白质Brazzein是一种高甜度、低热值的新型非糖甜味剂。但是由于受到产地种植的限制等，难以实现Brazzein的大量生产。近几年人们引入生物工程方法获得甜味蛋白。如图是科学家培育能生产甜味蛋白质Brazzein乳腺生物反应器的过程，请回答相关问题：

（1）甜味蛋白质Brazzein基因，可采用PCR技术进行大量扩增，但前提是______________。过程①可采用动物病毒转染法，利用携带目的基因的病毒感染胚胎干细胞，实现对胚胎干细胞的__________。
（2）过程③通常从雌性小鼠的_______________中获取囊胚。过程④是将胚胎干细胞显微注射到小鼠的囊胚腔内形成嵌合体囊胚，将不同的基因转移、组合到嵌合体中，利用这一种方法可以解决________________的困难。
（3）过程⑤中要对受体小鼠进行_____________处理，得到的嵌合体小鼠的毛色为___________________。
（4）鉴定嵌合体小鼠是否成功表达甜味蛋白质Brazzein，可以利用_____________原理对小鼠乳汁中的特异性蛋白进行检测。

胡萝卜是伞形科的两年生草本植物，因其营养丰富且老少皆宜，成为了人们餐桌上一种重要的食材，回答下列有关问题：
（1）胡萝卜可生吃，可炖煮，还可以制作成泡菜，泡菜发酵过程中会产生亚硝酸盐，因此食用前需要检测泡菜中亚硝酸盐的含量而避免中毒，测定亚硝酸盐含量的常用方法是___________。制作泡菜时，若泡菜坛未密封好，则会因杂菌污染而导致制作失败，为探明导致泡菜制作失败的微生物种类，实验小组将被污染的泡菜液接种到培养基上进行培养。常用于统计活菌数目的接种方法是_____________________，使用该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目偏低，原因是___________________________。统计微生物数目的方法除利用菌落进行活菌计数外，还有________________法。
（2）胡萝卜中含有大量的胡萝卜素，天然胡萝卜素具有使癌细胞恢复成正常细胞的功能，根据胡萝卜素具有易溶于有机溶剂的特点，常采用____________法提取胡萝卜素。
（3）芫荽，又名香菜，也是伞形科的一种常见食材，香菜之所以具有香气，是因为其含有挥发性精油，精油在日常生活中有着广泛的应用，不同精油的制备过程不同，这与其原料的性质等有关，柚皮在水中蒸馏时容易焦糊，宜采用_____________法提取柚皮精油；玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，常选择______________法进行提取。

甘蔗是最重要的糖料作物。下图为利用甘蔗汁制糖，利用糖蜜生产酒精的流程图。

（1）以甘蔗为原料生产结晶糖过程会产生副产品糖蜜，糖蜜经酵母菌等微生物的发酵生成______和酒精，该过程在酵母菌的_________中进行。生产过程同时产生含有大量糖类、蛋白质、无机盐的甘蔗糖蜜酒精废液，直接排放会造成水体富营养化。
（2）为选育能分解甘蔗糖蜜酒精废液，生产腐殖酸的真菌，科研人员进行下列实验。
①采集的土样，加入一定量的_______制成土壤稀释液。取土壤稀释液加入到______液中培养48h，连续重复上述操作两次，重复操作的目的是__________________。
②用________法将培养液接种于平板上，观察菌落生长情况，选取菌落较大的菌株作为初筛菌种。把初筛菌种接入甘蔗糖蜜酒精废液中培养，一段时间后测定液体吸光值，与__________吸光值相比较，进一步筛选分解能力强的菌种。
③科研人员将筛选得到的菌株E进行6次传代培养，测定了各代菌株的腐殖酸产生量，结果如图，并选用此菌株进行工业化生产。该步骤的目的是______________________。

下列实验操作正确的是（   ）

A．在 LB 固体培养基中加入尿素用以分离产脲酶的微生物

B．接种环蘸取菌种在固体培养基上进行分离可用于计数

C．制作葡萄酒时将葡萄汁装满发酵瓶以保证无氧的发酵环境

D．制作泡菜时坛口用水封好，可防止外界空气进入

下列有关生物技术的叙述中，正确的是

A．运用固定化酶进行生产时，需要控制好环境的条件，如温度、溶氧、营养等

B．固定化酵母菌利用葡萄糖的效率比游离的酵母菌要高

C．探究加酶洗衣粉的最适温度时，洗衣粉量、污渍的种类属于自变量

D．用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌实际数目低

某植物组织含有果胶、淀粉和纤维素等成分，某科研小组开展对该植物组织相关成分以及相关酶综合利用的研究，请回答：
（1）果胶存在于该植物组织的______，果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括______。
（2）在淀粉分离提取研究中，为促进淀粉沉降，需添加生物制剂（乳酸菌菌液）。为了获得较纯的乳酸菌菌株，通常采用______操作，该操作的目的是______。
（3）纤维素分解菌是高效利用该组织纤维素的菌种。筛选菌种时需到富含纤维素的环境中去寻找，说明了在自然界寻找各种目的菌株时，遵循的共同原则是______。为确定得得到的菌株是纤维素分解菌，可采用对纤维素酶分解滤纸后产生______进行定量测定。
（4）若要将纤维素分解菌固定化，不适宜采用物理吸附法的原因是______。

(1)要统计泳池水源中的活菌总数，应该采用的方法是_______________________。工作者将三个接种了等量水源水的培养基置于37℃的恒温箱中培养。24小时后观察到三个平板上的菌落数目为21、256、215，请分析结果出现的可能原因_____________________，并提供解决方案：______________________________________________________。
(2)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：
 
注：“+”表示有，“-”表示无。
据表判断，培养基甲_______（填“能”或“不能”）用于分离纤维素分解菌，原因是_____________________________________；培养基乙________（填“能”或“不能”）用于鉴别纤维素分解菌，原因是_______________________________________。
(3)果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括______________、_______________和果胶酯酶等，在果汁加工中，果胶酶可以起到_________________________等作用。

请回答下列问题。
（1）从微生物所能利用的氮源种类来看，一部分微生物是不需要利用氨基酸作为氮源的，它们能把_____（列举两例）等简单氮源用于合成所需要的一切氨基酸，因而可称为“氨基酸自养型生物” 。
（2）伊红美蓝培养基可用于饮用水大肠杆菌数目的测定，根据培养基上黑色菌落的数目推测大肠菌的数量。但单位体积饮用水中大肠杆菌数量相对较少，若直接将一定体积的自来水接种到培养基中，培养后可能无法得到菌落或菌落数目太少，可通过“滤膜法”解决这个问题，其操作思路是：_____。稀释涂布平板法和______________________法是测定微生物数量更常用的两种方法。
（3）在固定化细胞实验中，明胶、琼脂糖、海藻酸钠等物质能作为包埋细胞载体的原因是______。在工业生产中，细胞的固定化是在严格_____条件下进行的。
（4）为探究一种新型碱性纤维素酶去污效能，研究小组进行了不同类型洗衣粉实验，结果如下图。加酶洗衣粉中目前常用的四类酶制剂除纤维素酶外，还有_____（至少答两类）。根据以上实验结果，_____________（能/否）得出对污布类型 2 的去污力最强是因碱性纤维素酶所致，并说明原因_________。