嗜热链球菌属于一种乳酸菌。分离出优质的嗜热链球菌是酸奶工业中的关键环节,以下是嗜热链球菌的有关分离纯化与鉴定过程,请回答相关问题。
第一步:从国家乳业技术中心获得混合发酵剂(含多种乳酸菌),用无菌生理盐水梯度稀释。
第二步:取等量不同稀释度的菌液分别接种于Elliker培养基,在相同且适宜条件下培养。
第三步:选取疑似菌落分别穿刺接种于ABC三种糖发酵半固体培养基(成分及现象如下表)中培养,进一步进行生化鉴定。
成分(g)
| 胰蛋白胨
| 牛肉膏
| 葡萄糖
| 蔗糖
| 麦芽糖
| 溴甲酚紫
| NaCl
| 琼脂
| 现象
|
A培养基
| 10
| 3.0
| 5.0
| 无
| 无
| 0.04
| 5.0
| 5.0
| 紫色变为黄色
|
B培养基
| 无
| 5.0
| 无
| 紫色变为黄色
|
C培养基
| 无
| 无
| 5.0
| 不变色
|
说明
| 1.溴甲酚紫是一种酸碱指示剂,在中性时为紫色,碱性时为深红色,而在酸性时呈现黄色。 2.将上述成分溶解,pH调为7,用蒸馏水定容至1000mL;
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第四步:将生化鉴定为嗜热链球菌的疑似菌落进行扩大培养并保存。
(1)第一步中稀释的目的是______________________。
(2)在第二步中,利用的接种方法是____________,可根据菌落__________特征来选取疑似菌落。(写出两点)
(3)第三步中,如果接种的疑似菌落确实是嗜热链球菌,根据生化鉴定现象归纳其代谢特点为:利用___(葡萄糖/蔗糖/麦芽糖)作为主要碳源,并可以经_____(无氧/有氧)呼吸的方式分解底物,且在代谢产物中一定有____(酸/碱/中)性产物产生。NaCl的主要作用是_________。
(4)第四步中,如果要长期保存分离出的菌种常采用___________________的方法,并将其置于_____ ℃ 冷冻箱中保存。