尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后，才能被植物吸收利用。分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4·7H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	琼脂
1.4g	2.1g	0.2g	1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

 
（1）根据培养基的成分判断，该同学_________（填“能”或“不能”）分离出土壤中分解尿素的细菌，原因是________________________________________。
（2）接种前要对培养基进行___________。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在_______条件下进行。
（3）一位同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是_________________，应当怎样操作才可以避免此种现象？______________________________________。
（4）获取分解尿素的细菌后，如要临时保存，可将其接种在___________培养基上，等长成菌落后放在4 ℃的冰箱中保存。若要长期保存，可以采用___________的方法。

某校生物研究性学习小组的同学欲调查某冷饮店的冰块中大肠杆菌的含量。具体实验步骤如下:
第一步:配置培养基（成分：蛋白胨、氯化钠、乳糖、水、X和琼脂）；
第二步:制作无菌平板；
第三步:设置空白对照组和实验组，对照组接种①，实验组接种②。
第四步:将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。
回答下列问题:
（1）培养基中的乳糖可以为大肠杆菌提供________。为了方便大肠杆菌的鉴定，需要在培养基中添加成分X _______________，在该培养基表面，大肠杆菌的菌落呈现 ______（填颜色）。
（2）完善步骤三，①是__________________________ ，②是 ______________________________________ 。
（3）若该小组在空白对照组的平板上检测到少许菌落，请分析可能的原因:_________________________________________________________ 。
（4）将1mL冰块水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为 ___________________ 。

下表是筛选异养型细菌的培养基配方。

(1)苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，此培养基中的成分X除为目的菌提供能源外，还能提供________，该培养基从作用看属于________培养基。制备固体培养基时调节pH在________步骤后。
(2)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，则获得图B效果的接种方法是________。运用图A所示接种方法统计的菌落常常比活菌的实际数目________。在探究“酵母菌种群数量变化”实验中，已知每个计数室由25×16个小格组成，容纳液体的总体积为0.4 mm³，观察到图中计数室所示a、b、c、d、e 5个中格共有酵母菌80个，则1 mL样液中约有酵母菌________个。

(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加________可初步鉴定该种细菌能够分解尿素，原理用方程式表示为________________________；在筛选能够分解纤维素的微生物过程中，常用到________染色法。在培养基灭菌后倒平板前以________比例加入染液，这种鉴定方法的的不足是__________________。
(4)培养基通常用__________法灭菌，若无条件，也可用间隙灭菌法。其程序是：第一天，将培养基在100 ℃下维持30 min，然后在36～37 ℃下放置24 h；之后重复前面的操作2-3次。请分析：
①培养基在100 ℃下维持30 min的目的是______。
②在36～37 ℃下放置24 h后再加热的目的是__________。
③怎样证明间隙灭菌法的效果？ ________。

原油中含有大量有害的、致癌的多环芳烃。土壤中有些细菌可以以原油中的多环芳烃为碳源,在培养基中形成分解圈。为筛选出能高效降解原油的菌种,某小组同学设计了相关实验。下列有关叙述不正确的是

A．应配制被原油污染土壤的土壤稀释液备用	B．配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培养基
C．将土壤稀释液灭菌后接种到选择培养基上	D．在选择培养基上能形成分解圈的为所需菌种

研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用，两者的提取及应用如下图所示。

(1) 柚皮易焦煳，宜采用________法提取柚皮精油，新鲜的柚皮干燥去水并用________浸泡处理，该过程得到的糊状液体可通过________除去其中的固体杂质。
(2) 培养基中的尿素和牛肉膏可为乳酸菌A生长提供________。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其相对分子质量越大，电泳速度________。
(3) 做抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

(4) 柚皮油也可以用萃取法来提取，原因是__________________，分析上图，提高萃取效果的方法是__________________、__________________。