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在微生物培养的过程中，需要通过选择培养或鉴别培养的方法来筛选出目标菌种，下列与之相关的叙述中不正确的是
| A．纤维素分解菌能够分解刚果红染料，从而使菌落周围出现透明圈 |
| B．尿素分解菌能够将尿素分解为氨，从而使酚红指示剂变红 |
| C．在培养基中加入抗生素能够筛选出具有相应抗性的菌株 |
| D．在含有碳酸钙的培养基上生长的乳酸菌菌落周围会出现“溶钙圈” |
为获得果胶酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作。
（1）为分离果胶酶产生菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是________ 。制备的培养基常用____________ 法进行灭菌。
（2）科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中，震荡混匀，制成悬液。为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行__________ ,用________ 法接种于固体培养基上。接种后的培养基______ 状态放入培养箱。
（3）选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液（果胶与刚果红结合后显红色），一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落和_________ 直径的比值，筛选果胶酶高产菌株。
（4）将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的___________ （填“上清液”或“沉淀物”）获得粗提的果胶酶。将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性。进行吸光值测定时，需将____________ 与等量果胶溶液混合，作为实验的对照。
（1）为分离果胶酶产生菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是
| K2HPO4 | MgSO4 | NaNO3 | FeSO4 | 琼脂 | | |
| 0．1g | 0．5g | 3g | 0．01g | 2g | 15g | 加至1L |
（2）科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中，震荡混匀，制成悬液。为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行
（3）选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液（果胶与刚果红结合后显红色），一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落和
（4）将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的
微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。下列关于这两种接种方法的叙述中，不正确的是
| A．都只能用于固体培养基接种 | B．都能用于微生物的计数 |
| C．接种培养后均可获得单菌落 | D．接种工具使用后需要灭菌 |
“手机上的细菌比马桶上的还多?”央视和北京卫视的记者分别通过实验对手机和马桶上的细菌数量进行了调查，调查方法和结果如下。请回答下列问题：
（1）根据图中结果可知，两电视台展示的实验均采用___________法进行接种，该方法使用的接种工具是___________。细菌的数目除了可以使用如上方法测定外，还可以采用___________法。
（2）通过观察菌落的__________________等特征（至少两项），可知手机和马桶上都存在多种微生物。
（3）两电视台实验操作无误且完全一致，但报道结果截然不同，你认为原因可能是___________。
（4）实验员按图中方法取样，测定某手机屏幕的细菌数量，从10mL菌悬液中取出1 mL，稀释100倍，在3个平板上分别各接入0．1 mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为35、36和37，则该手机屏幕的细菌数为________个/cm2，该方法计数的结果往往比实际结果偏_______（填“高”或“低”）。
（5）有些使用后的培养基在丢弃前需要经过_________处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。
（1）根据图中结果可知，两电视台展示的实验均采用___________法进行接种，该方法使用的接种工具是___________。细菌的数目除了可以使用如上方法测定外，还可以采用___________法。
（2）通过观察菌落的__________________等特征（至少两项），可知手机和马桶上都存在多种微生物。
（3）两电视台实验操作无误且完全一致，但报道结果截然不同，你认为原因可能是___________。
（4）实验员按图中方法取样，测定某手机屏幕的细菌数量，从10mL菌悬液中取出1 mL，稀释100倍，在3个平板上分别各接入0．1 mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为35、36和37，则该手机屏幕的细菌数为________个/cm2，该方法计数的结果往往比实际结果偏_______（填“高”或“低”）。
（5）有些使用后的培养基在丢弃前需要经过_________处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。
下列有关微生物培养的叙述中，不正确的是（）
| A．获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染 |
| B．单菌落的分离是消除污染杂菌的通用方法 |
| C．培养基都必须使用高压蒸汽灭菌法灭菌 |
| D．倒置平板防止培养皿盖上的冷凝水滴落 |
回答下列（一）（二）小题：
（一）柑橘汁在国内外市场上是最受人们欢迎的饮料之一。其大致的生产工艺流程如下：柑橘→选果与洗净→榨汁→过滤→果汁的调和→脱油和脱气→加热杀菌→装填和冷却。
（1）为提高柑橘的出汁率，榨汁时一般采用以下两种处理方式：一是加________处理，分解果肉组织中的果胶物质，提高出汁率；二是__________处理，使细胞原生质中的蛋白质凝固，改变了细胞的半透性，从而提高出汁率。
（2）果汁中含有3%～5%的果肉浆能给予果汁良好的色泽和浊度，但过量会使果汁粘稠化。检测柑橘汁中果肉浆含量是否合格，可采用比浊法，需要先绘制果肉浆含量与光密度值关系的______________，再通过测定样品柑橘汁的______________进行计算。
（3）工业生产中的果汁在装填之前需杀菌处理。柑橘的果汁pH一般都较低，因此杀菌时主要以______为杀菌对象。在微生物的分离、计数过程中，常采用_____________法接种，计数过程中统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为____________。
（二）从西非热带植物果实中提取的甜味蛋白质Brazzein是一种高甜度、低热值的新型非糖甜味剂。但是由于受到产地种植的限制等，难以实现Brazzein的大量生产。近几年人们引入生物工程方法获得甜味蛋白。如图是科学家培育能生产甜味蛋白质Brazzein乳腺生物反应器的过程，请回答相关问题：
（1）甜味蛋白质Brazzein基因，可采用PCR技术进行大量扩增，但前提是______________。过程①可采用动物病毒转染法，利用携带目的基因的病毒感染胚胎干细胞，实现对胚胎干细胞的__________。
（2）过程③通常从雌性小鼠的_______________中获取囊胚。过程④是将胚胎干细胞显微注射到小鼠的囊胚腔内形成嵌合体囊胚，将不同的基因转移、组合到嵌合体中，利用这一种方法可以解决________________的困难。
（3）过程⑤中要对受体小鼠进行_____________处理，得到的嵌合体小鼠的毛色为___________________。
（4）鉴定嵌合体小鼠是否成功表达甜味蛋白质Brazzein，可以利用_____________原理对小鼠乳汁中的特异性蛋白进行检测。
（一）柑橘汁在国内外市场上是最受人们欢迎的饮料之一。其大致的生产工艺流程如下：柑橘→选果与洗净→榨汁→过滤→果汁的调和→脱油和脱气→加热杀菌→装填和冷却。
（1）为提高柑橘的出汁率，榨汁时一般采用以下两种处理方式：一是加________处理，分解果肉组织中的果胶物质，提高出汁率；二是__________处理，使细胞原生质中的蛋白质凝固，改变了细胞的半透性，从而提高出汁率。
（2）果汁中含有3%～5%的果肉浆能给予果汁良好的色泽和浊度，但过量会使果汁粘稠化。检测柑橘汁中果肉浆含量是否合格，可采用比浊法，需要先绘制果肉浆含量与光密度值关系的______________，再通过测定样品柑橘汁的______________进行计算。
（3）工业生产中的果汁在装填之前需杀菌处理。柑橘的果汁pH一般都较低，因此杀菌时主要以______为杀菌对象。在微生物的分离、计数过程中，常采用_____________法接种，计数过程中统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为____________。
（二）从西非热带植物果实中提取的甜味蛋白质Brazzein是一种高甜度、低热值的新型非糖甜味剂。但是由于受到产地种植的限制等，难以实现Brazzein的大量生产。近几年人们引入生物工程方法获得甜味蛋白。如图是科学家培育能生产甜味蛋白质Brazzein乳腺生物反应器的过程，请回答相关问题：
（1）甜味蛋白质Brazzein基因，可采用PCR技术进行大量扩增，但前提是______________。过程①可采用动物病毒转染法，利用携带目的基因的病毒感染胚胎干细胞，实现对胚胎干细胞的__________。
（2）过程③通常从雌性小鼠的_______________中获取囊胚。过程④是将胚胎干细胞显微注射到小鼠的囊胚腔内形成嵌合体囊胚，将不同的基因转移、组合到嵌合体中，利用这一种方法可以解决________________的困难。
（3）过程⑤中要对受体小鼠进行_____________处理，得到的嵌合体小鼠的毛色为___________________。
（4）鉴定嵌合体小鼠是否成功表达甜味蛋白质Brazzein，可以利用_____________原理对小鼠乳汁中的特异性蛋白进行检测。
回答下列问题：
（一）测定水样是否符合饮用水卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的数目。滤膜法的大致流程：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到伊红美蓝的培养基（EMB 培养基）上培养→统计菌落数目。流程示意图如下图所示。其中，指示剂伊红美蓝可使大肠杆菌菌落呈现紫黑色。请据图回答问题：
（1）过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，其中需要进行灭菌处理的是_______________，与过滤有关的操作都要在______________旁进行。
（2）将完成过滤之后的滤膜紧贴在 EMB 培养基上，这属于微生物培养中的________操作。从物理状态角度分析，EMB 培养基属于________培养基，从功能上分属于_______培养基。
（3）某生物兴趣小组的同学尝试按照上述方法进行测定，无菌操作下将 10 mL 待测水样加入到 90 mL 无菌水中，稀释后的菌液通过滤膜法测得 EMB 培养基上的菌落数平均为 124，紫黑色菌落数平均为 31，则推测 1 L待测水样中的大肠杆菌数目为________。
（4）大肠杆菌进行扩大培养时，用摇床振荡培养的目的是__________________________。
（5）在配制尿素培养基中，通过选用合适_____的滤膜代替 G6 玻璃砂漏斗，也可去除尿素溶液中杂菌。
（二）浙江某地家庭农场模式简图如下，请回答与生态工程有关的问题：
（1）农场主将种植、养殖、旅游副业（采摘、垂钓）等进行了合理优化，还将农业废弃物和生活污水的转化、再生及资源化等综合起来，实现对能量的____________。这种做法正是建立生态农业发展循环经济的一种模式，遵循的基本原理是________________和_______________。
（2）由于果树幼苗间空间很大，农场主将甘薯、油菜________在果园中。打落菜籽以后，农场主把这些油菜秸秆置还果园地，覆盖在果树的根部上，又把榨油以后的菜籽饼施入果园，保持____________，提高水果的品质，求得最大化的生态效益和____________。该生态农场能生产出无公害水果的原因是减少了_______的使用，减少了环境污染。
（一）测定水样是否符合饮用水卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的数目。滤膜法的大致流程：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到伊红美蓝的培养基（EMB 培养基）上培养→统计菌落数目。流程示意图如下图所示。其中，指示剂伊红美蓝可使大肠杆菌菌落呈现紫黑色。请据图回答问题：
（1）过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，其中需要进行灭菌处理的是_______________，与过滤有关的操作都要在______________旁进行。
（2）将完成过滤之后的滤膜紧贴在 EMB 培养基上，这属于微生物培养中的________操作。从物理状态角度分析，EMB 培养基属于________培养基，从功能上分属于_______培养基。
（3）某生物兴趣小组的同学尝试按照上述方法进行测定，无菌操作下将 10 mL 待测水样加入到 90 mL 无菌水中，稀释后的菌液通过滤膜法测得 EMB 培养基上的菌落数平均为 124，紫黑色菌落数平均为 31，则推测 1 L待测水样中的大肠杆菌数目为________。
（4）大肠杆菌进行扩大培养时，用摇床振荡培养的目的是__________________________。
（5）在配制尿素培养基中，通过选用合适_____的滤膜代替 G6 玻璃砂漏斗，也可去除尿素溶液中杂菌。
（二）浙江某地家庭农场模式简图如下，请回答与生态工程有关的问题：
（1）农场主将种植、养殖、旅游副业（采摘、垂钓）等进行了合理优化，还将农业废弃物和生活污水的转化、再生及资源化等综合起来，实现对能量的____________。这种做法正是建立生态农业发展循环经济的一种模式，遵循的基本原理是________________和_______________。
（2）由于果树幼苗间空间很大，农场主将甘薯、油菜________在果园中。打落菜籽以后，农场主把这些油菜秸秆置还果园地，覆盖在果树的根部上，又把榨油以后的菜籽饼施入果园，保持____________，提高水果的品质，求得最大化的生态效益和____________。该生态农场能生产出无公害水果的原因是减少了_______的使用，减少了环境污染。
羽毛的成分主要是角蛋白，是一类结构稳定、不溶于水的蛋白质，目前缺乏对其高效降解的处理方法。实验人员从废弃羽毛堆积处的土壤中分离筛选出具有高效降解羽毛角蛋白的细菌，请回答下列问题：
（1）筛选高效降解羽毛角蛋白的细菌需从废弃羽毛堆积处的土壤中取样，其原因是____________。
（2）筛选高效降解羽毛角蛋白的细菌的培养基中应加入____作为唯一碳源，所用培养基从功能上来看属于_____培养基，该培养基中还需要加入适量的K2HPO4和KH2PO4，其作用是______________，对培养基灭菌的常用方法是___________________。
（3）角蛋白酶是羽毛降解菌的一种分泌蛋白，为了测定其角蛋白酶的活性，应让羽毛降解菌发酵，然后将发酵液离心，再从________（填“沉淀物”或“上清液”）取样。为了将角蛋白酶和其他蛋白质分离，可用电泳法分离蛋白质，电泳法可以根据蛋白质分子__________的不同，将蛋白质分离。测定羽毛降解菌角蛋白酶活性的主要目的是_____________。
（1）筛选高效降解羽毛角蛋白的细菌需从废弃羽毛堆积处的土壤中取样，其原因是____________。
（2）筛选高效降解羽毛角蛋白的细菌的培养基中应加入____作为唯一碳源，所用培养基从功能上来看属于_____培养基，该培养基中还需要加入适量的K2HPO4和KH2PO4，其作用是______________，对培养基灭菌的常用方法是___________________。
（3）角蛋白酶是羽毛降解菌的一种分泌蛋白，为了测定其角蛋白酶的活性，应让羽毛降解菌发酵，然后将发酵液离心，再从________（填“沉淀物”或“上清液”）取样。为了将角蛋白酶和其他蛋白质分离，可用电泳法分离蛋白质，电泳法可以根据蛋白质分子__________的不同，将蛋白质分离。测定羽毛降解菌角蛋白酶活性的主要目的是_____________。
果胶酶广泛用于食品工业、纺织品加工业和造纸工业等领域。请结合所学知识，同答下列问题：
（1）果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括_______________（至少答出2种）等。
（2）下表是筛选产果胶酶微生物时所用的一种培养基的配方：
①该培养基能够筛选到产果胶酶的微生物的原因是____。为了能够筛选出分解果胶的微生物菌落，该培养基还需要添加____。
②该培养基中的刚果红可以与____形成红色复合物。我们可以通过菌落周围是否产生____来筛选产果胶酶的微生物。
（3）某果胶酶高产菌株产生的果胶酶为分子量不同的多种酶复合物，可以采取____法将这些酶在保持活性下进行有效分离。
（4）果胶酶应用于果汁生产时，主要解决的两大问题分别是：____________________。
（1）果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括_______________（至少答出2种）等。
（2）下表是筛选产果胶酶微生物时所用的一种培养基的配方：
| K2HPO4 | MgSO4 | NaNO3 | FeSO4 | 果胶 | 刚果红 | 水 |
| 0.1g | 0.5g | 3g | 0.001g | 2g | 1g | 加至1L |
①该培养基能够筛选到产果胶酶的微生物的原因是____。为了能够筛选出分解果胶的微生物菌落，该培养基还需要添加____。
②该培养基中的刚果红可以与____形成红色复合物。我们可以通过菌落周围是否产生____来筛选产果胶酶的微生物。
（3）某果胶酶高产菌株产生的果胶酶为分子量不同的多种酶复合物，可以采取____法将这些酶在保持活性下进行有效分离。
（4）果胶酶应用于果汁生产时，主要解决的两大问题分别是：____________________。
（1）微生物培养过程中都需要培养基，微生物不同，所需要的培养基也不同。一般培养细菌的是________ 培养基；培养真菌的是________ 培养基；培养酵母菌的是____________ 培养基。这些培养基一般都含有________________ 四类物质。
（2）植物体中含有多种有用的物质，不同物质需要用不同的方法提取，一般提取玫瑰精油用________ 法，提取橘皮精油用____________ 法，而胡萝卜素的提取用________ 法。
（3）最近引人瞩目的新冠肺炎病毒属于冠状病毒科冠状病毒属，由包膜和 RNA 组成，包膜中含有三种糖蛋白，若现在要将新冠肺炎病毒组成成分进行分离，你认为最可能用到的方法是___________ 。
（2）植物体中含有多种有用的物质，不同物质需要用不同的方法提取，一般提取玫瑰精油用
（3）最近引人瞩目的新冠肺炎病毒属于冠状病毒科冠状病毒属，由包膜和 RNA 组成，包膜中含有三种糖蛋白，若现在要将新冠肺炎病毒组成成分进行分离，你认为最可能用到的方法是