题干

科研人员利用大肠杆菌构建了抗虫基因文库。最新研究发现漏斗蜘蛛中的AH基因控制合成的毒素肽具有显著的杀虫效果,现以p-B质粒为载体,构建AH基因的cDNA文库。图1表示p-B质粒,其中Cm!r表示氯霉素抗性基因,ccdB 基因表达产物能抑制大肠杆菌DNA复制。图中箭头表示相关限制酶的酶切位点,且不同种限制酶识别序列不同,其中Aiu I、Xba I、Ssp I和Mfe I识别的碱基序列和酶切位点分别是AGLCT、T4CTAGA、AATIATT、 CIAATTG。请分析回答:

(1)为获得AH基因的cDNA,先要从漏斗蜘蛛毒素肽分泌细胞中提取_________,再利用反应体系中添加__________,从而准确合成出AH基因的cDNA,排除其他提取物的干扰。若从漏斗蜘蛛其他组织细胞提取,则难以成功,原因是其他组织细胞中_________。
(2)利用图中的质粒和AH基因构建重组质粒时,宜选用________双酶切质粒,再选用_________切割目的基因,将切割后获得的DNA片段混合,经DNA连接酶处理后,再与大肠杆菌混合培养,在含有适量氯霉素的培养基中添加适量冷冻的________,以促进转化。
(3)经上述处理培养后,获得存活的大肠杆菌中应含有的质粒是________,原因是_________。
上一题 下一题 0.99难度 综合题 更新时间:2020-03-27 10:38:28

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同类题2

葡萄酒是葡萄汁经酵母菌发酵而成的。酿制葡萄酒的两个简易装置如图所示。回答下列问题:
   
(1)试管中的 X 溶液有助于维持甲装置的瓶中气压相对稳定,与乙装置相比,用甲装置酿制葡萄酒的优点是_____(答出两点即可)。
(2)葡萄汁装入甲装置时,要留有约 1/3 的空间,这种做法的目的是_______________(答出两点即可)。
(3)某同学若用乙装置进行发酵,并设置两个不同处理组(乙 A 和乙 B),乙 A 装置中保留一定量的氧气,乙 B 装置中没有氧气。在其他条件相同且适宜的情况下,测得一段时间内乙 A 和乙 B 中酒精含量的变化趋势及乙 A 中氧气含量的变化趋势如曲线图所示。图中曲线①、③依次表示_____、_____含量的变化趋势。
(4)从细胞呼吸类型看,酵母菌属于_____生物;从同化作用的类型看,酵母菌属于_____(填“自养”或“异养”)生物。
(5)若某高校改进装置采用如图所示的发酵罐进行葡萄酒主发酵过程的研究,下列叙述错误的是:
________。

A.夏季生产果酒时,常需对罐体进行降温处理
B.乙醇为挥发性物质,故发酵过程中空气的进气量不宜太大
C.正常发酵过程中罐内的压力不会低于大气压
D.可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵
(二)毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIF-Ⅱ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。KIF-Ⅱ 基因的高绒质绒山羊的简单流程如图:

(1)转基因过程用到的工具酶有_____和_____。
(2)在过程②中,用_____处理将皮肤租住分散成单个成纤维细胞。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚,因此在培养细胞时需在培养基中加入一定量的_______,在培养过程中,应将培养瓶置于_____中培养。
(3)若要获得多只相同的转基因山羊,可进行胚胎分割和胚胎移植。下列关于采用移植技术的叙述,正确的是________
A.采取激素注射等方法对转基因山羊作超数排卵处理
B.体外培养发育到原肠胚期的胚胎即可进行移植
C.使用免疫抑制剂以避免代孕牛对植入胚胎的排斥反应
D.利用胚胎分割技术,同卵双胎较同卵多胎成功率更高