题干

科研人员利用大肠杆菌构建了抗虫基因文库。最新研究发现漏斗蜘蛛中的AH基因控制合成的毒素肽具有显著的杀虫效果,现以p-B质粒为载体,构建AH基因的cDNA文库。图1表示p-B质粒,其中Cm!r表示氯霉素抗性基因,ccdB 基因表达产物能抑制大肠杆菌DNA复制。图中箭头表示相关限制酶的酶切位点,且不同种限制酶识别序列不同,其中Aiu I、Xba I、Ssp I和Mfe I识别的碱基序列和酶切位点分别是AGLCT、T4CTAGA、AATIATT、 CIAATTG。请分析回答:

(1)为获得AH基因的cDNA,先要从漏斗蜘蛛毒素肽分泌细胞中提取_________,再利用反应体系中添加__________,从而准确合成出AH基因的cDNA,排除其他提取物的干扰。若从漏斗蜘蛛其他组织细胞提取,则难以成功,原因是其他组织细胞中_________。
(2)利用图中的质粒和AH基因构建重组质粒时,宜选用________双酶切质粒,再选用_________切割目的基因,将切割后获得的DNA片段混合,经DNA连接酶处理后,再与大肠杆菌混合培养,在含有适量氯霉素的培养基中添加适量冷冻的________,以促进转化。
(3)经上述处理培养后,获得存活的大肠杆菌中应含有的质粒是________,原因是_________。
上一题 下一题 0.99难度 综合题 更新时间:2020-03-27 10:38:28

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水稻是我国最重要的粮食作物。稻瘟病是由稻瘟病菌(Mp)侵染水稻引起的病害,严重危害我国粮食生产安全。与使用农药相比,抗稻瘟病基因的利用是控制稻瘟病更加有效、安全和经济的措施。现有甲(R1R1r2r2r3r3)、乙(r1r1R2R2r3r3)、丙(r1r1r2r2R3R3)三个水稻抗病品种,抗病(R)对感病(r)为显性,三对抗病基因位于不同染色体上。根据基因的 DNA 序列设计特异性引物,用 PCR 方法可将样本中的 R1、r1、R2、r2、R3、r3 区分开。这种方法可用于抗病品种选育中基因型的鉴定。并且研究发现,水稻的抗病表现不仅需要自身抗病基因(R1、R2、R3等)编码的蛋白,也需要 Mp 基因(A1、A2、A3等)编码的蛋白。只有 R 蛋白与相应的 A 蛋白结合,抗病反应才能被激活。

用甲品种与感病品种杂交后,对F2不同植株的 R1、r1进行 PCR 扩增。已知 R1比r1 片段短。如下为扩增结果。请分析选项中正确的是:
A.水稻种植区的 Mp 是由不同基因型组成的群体。大面积连续种植某个含不同抗病基因的水稻品种,将会引起 Mp 种群基因频率改变,使该品种抗病性逐渐减弱直至丧失,无法在生产中继续使用
B.为了在较短时间内将甲、乙、丙三个品种中的抗病基因整合,选育新的纯合抗病植株,育种步骤的正确排序是先将甲×乙,得到F1R1r1R2r2r3r3植株×丙,得到不同基因型的子代,再用 PCR 方法选出 R1R1R2R2R3R3植株
C.若基因型为 R1R1r2r2R3R3和 r1r1R2R2R3R3的水稻,被基因型为 a1a1A2A2a3a3的 Mp侵染,推测这两种水稻的抗病性表现依次为抗病、感病
D.研究人员每年用 Mp(A1A1a2a2a3a3)人工接种水稻品种甲(R1R1r2r2r3r3),几年后甲品种丧失了抗病性,检测水稻的基因未发现变异。推测甲品种抗病性丧失的原因是 Mp 的A1基因发生了突变。