CAR-T细胞疗法是通过设计CAR基因，并导入癌症患者的T细胞中，使其转化为CAR-T细胞，CAR-T细胞膜上的CAR蛋白与癌细胞表面抗原特异结合后，激活CAR-T细胞使其增殖、分化，从而实现对癌细胞的特异性杀伤和记忆，主要过程如下图。请回答：

(1)过程①中，需要先要用____切割不同的DNA片段形成黏性末端，再利用____连接形成CAR基因。
(2)将CAR基因导入患者T细胞前，必须先完成过程②，一是因为CAR基因片段小，在细胞中容易丟失;二是因为缺少____，CAR基因在T细胞中不能复制。
(3)完成过程③常用方法是____。此外，还可以先将CAR基因整合到逆转录病毒载体中，再利用病毒的____性导入并将CAR基因整合到T细胞的____上。
(4)根据图示，CAR-T细胞对癌细胞的特异性杀伤主要取决于CAR蛋白____区。CAR-T细胞疗法具有持久性是因为CAR-T细胞能够在体内____。

科学冢提出，将蓝藻中的某基因导入到水稻细胞内，可以提高水稻的产量，而将水稻中的某基因导入到蓝藻细胞内，也可以对蓝藻进行改造。请回答下列相关问题：
（1）基因工程最核心的步骤是____________________________，这个过程需要用到什么酶?____________________________________________________________。
（2）从目的基因的获取途径来看，将蓝藻中的基因导入到水稻细胞内，目的基因可以从蓝藻的_______________________文库中获取，将水稻的基因导入到蓝藻细胞中，目的基因可以从水稻的___________________________________文库中获取。
（3）用溶菌酶等处理，可以将蓝藻细胞转化为感受态细胞，便于目的基因进入蓝藻细胞。若要将目的基因导入到水稻细胞，一般用若用农杆菌转化法，先将目的基因插入农杆菌的__________质粒的______________内部，再将含有目的基因的农杆菌和水稻愈伤组织混合处理，为提高转化效率，可以在水稻愈伤组织细胞表面涂上一些_________________。
（4）要确认高产水稻是否培育成功，必须要对培育出的水稻做什么样的检测?____________________________________________________________________________

下列关于基因工程的叙述，错误的是

A．cDNA文库中的基因可以进行物种间的基因交流

B．转基因棉花是否具抗虫特性可通过检测棉花对某种害虫的抗性来确定

C．外源DNA必须位于重组质粒的起始密码和终止密码之间才能进行表达

D．抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染

利用现代生物技术可对生物进行改造。例如：
①从某细菌中获取抗虫基因，并与质粒运载体拼接成重组DNA，导入棉花的愈伤组织细胞内，经培养、筛选和培育获得抗虫棉品种；
②将人胰岛素基因与质粒运载体才并接成重组DNA，再导入某种细菌细胞内，大量培养该种细菌，以生产医用的人胰岛素；
③取某种植物花粉，先组织培养形成完整桂林，再用秋水仙素处理，使之染色体加倍；
④将大鼠的生长激素基因与质粒运载体拼接成重组DNA，注射入小鼠的受精卵内，体外培养该受精卵使之发育到一定的胚胎阶段后，移植入代孕小鼠体内，产生“超级小鼠”； 
⑤取转基因抗冻番茄叶片经组织培养，产生再生植株，达到快速繁殖抗冻番茄的目的。根据上述材料回答问题。
【小题1】上述例子中，用到基因工程技术的有____________（填序号）。目的基因除了人工合成外，
还可通过________方法获取，拼接重组DNA的步骤中，都需要用到限制性内切酶和____________酶。
【小题2】与杂交的方法相比用例③中方法得到纯合子所需时间____________（较短/较长/相同）；用例⑤中所用方法大量去繁殖抗冻番茄时，抗冻基因____（更容易/不容易/一样容易）丢失。
【小题3】上述例子中，需要用到植物组织培养技术的有____________（填序号），植物组织培养技术的基本原理是植物活细胞具有______。

英国的科学家利用转基因技术培育出含有大鼠生长激素基因的巨型小鼠，如图是制备转基因小鼠的操作过程。图中编号表示过程，A～D表示限制酶，字母下方的斜线指向的是相应的酶切位点。

【小题1】图中过程① 需要用到的限制酶是___________ 和___________；过程②所用到的酶是___________。
【小题2】图中过程③ 所用方法是___________，受体细胞一般采用___________细胞。得到巨型小鼠后，可取其体细胞核，采用___________进行繁育。
【小题3】从转基因生物的安全性方面考虑，上述转基因小鼠研究必须在限定范围内进行，这一做法的目的是防止____________基因向其他生物扩散。