研究人员将鱼的抗冻基因导入番茄体内，获得抗冻能力明显提高的番茄新品种。下列操作合理的是

A．设计相应DNA单链片段作为引物，利用PCR技术扩增目的基因

B．利用限制性核酸内切酶和DNA聚合酶构建基因表达载体

C．将基因表达载体导入番茄体细胞之前需用Ca2+处理细胞

D．运用DNA分子杂交技术检测抗冻基因是否在番茄细胞中表达

基因工程步骤不包括（   ）

A．对染色体进行改造	B．目的基因与运载体结合
C．将目的基因导入受体细胞	D．目的基因的检测与鉴定

研究人员用图1中质粒和图2中含目的基因的片段构建重组质粒（图中标注了相关限制酶切割位点），将重组质粒导入大肠杆菌后进行筛选及PCR鉴定。以下叙述不正确的是

A．构建重组质粒的过程应选用BclⅠ和HindⅢ两种限制酶

B．使用DNA连接酶将酶切后的质粒和目的基因片段进行重组

C．能在添加四环素的培养基上生存一定是含有重组质粒的大肠杆菌

D．利用PCR鉴定含目的基因的大肠杆菌时应选用引物甲和引物丙

下图为转基因抗冻番茄培育过程的示意图。（其中amp^r为抗氨苄青霉素基因）下列叙述正确的是

A．可同时选用限制酶PstI、Sma I对含目的基因的DNA进行切割

B．过程②中，可直接将过程①得到的产物注入受体细胞

C．过程③需要用到纤维素酶和果胶酶，以便获得并培养活的原生质体

D．过程④中，若利用探针在试管苗细胞内检测到目的基因，则转基因成功

胶原蛋白广泛应用于医学、化妆品、化工原料等领域，科研人员开展利用家蚕生产人胶原蛋白的研究。请回答下列问题：
（1）家蚕核型多角体病毒(BmNPV)专性寄生于鳞翅目昆虫，将人胶原蛋白基因与___重组后，构建___。体外克隆目的基因的方法是____。
（2）BmNPV的pl0基因是极强的启动子，将目的基因连接在pl0基因的下游，目的是____。目的基因与pl0基因连接时，断裂与连接的化学键都是____。
（3）重组BmNPV感染家蚕幼虫后，在幼虫淋巴液中提取蛋白质，用____的方法检测目的基因是否成功表达。相比于大肠杆菌，选择家蚕作为人胶原蛋白的生物反应器，其优点是_______ 。