人乳铁蛋白是一种药用保健蛋白。下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程，图中Tet^r表示四环素抗性基因，Amp^r表示氨苄青霉素抗性基因，五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示，请回答以下问题：


（1）要将人乳铁蛋白基因插入质粒，若只允许使用一种限制酶，应选择的限制酶是___________，酶能起催化作用的原理是____________________________________________。
（2）据图分析筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含______________________（填“四环素”“氨苄青霉素”或“四环素或氨苄青霉素”）的培养基上进行，原因是_________________________________。
（3）若BamH I酶切的DNA末端与BclI酶切的DNA末端连接起来，连接部位的6个碱基对序列为___________，对于该部位，这两种酶___________（填“都不能”或“只有一种能”）切开。
（4）培养出早期胚胎后，科学家欲进行胚胎分割移植，则应该选择发育良好、形态正常的___________，将其移入盛有操作液的培养皿中，然后用分割针进行分割。

2010年，中科院昆明动物研究所培育出中国首例转基因猕猴。这一研究成果标志着中国科学家在非人灵长类转基因动物研究方面达到世界领先水平，为未来人类重大疾病的非人灵长类动物模型的深入研究奠定了坚实的基础。下图是转基因猕猴培育过程的示意图，请据图回答：

（1）在构建基因表达载体过程中，它的组成除了目的基因外，还必须有启动子、终止子以及    。过程②中常用________________的方法将目的基因导入受精卵。
（2）在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O₂以维持细胞呼吸外，还需要提供CO₂气体以维持________________。
（3）图中过程⑦称为________，为使代孕雌猴与供体雌猴生殖器官的生理变化相同，此前需要用促性腺激素对代孕雌猴作________处理。
（4）若要同时获得多只与此转基因猕猴相同的小猴，可对早期胚胎进行________，操作时选择发育到桑椹胚或囊胚期的胚胎进行。若选用囊胚期的胚胎，操作过程需要特别注意的问题是：   。
（5）下列关于现代生物工程技术的安全性和伦理问题的分析，不合理的观点是：（ ）

A．转基因生物合成的某些新的蛋白质有可能成为某些人的过敏原或者引起中毒

B．运用DNA重组技术可以将致病菌或病毒改造成威力巨大的生物武器

C．我国的政策是禁止进行生殖性克降人

D．转基因生物进入自然界后不会与野生物种杂交而威胁其他生物的生存

 

基因工程步骤不包括（   ）

A．对染色体进行改造	B．目的基因与运载体结合
C．将目的基因导入受体细胞	D．目的基因的检测与鉴定

研究人员将鱼的抗冻基因导入番茄体内，获得抗冻能力明显提高的番茄新品种。下列操作合理的是

A．设计相应DNA单链片段作为引物，利用PCR技术扩增目的基因

B．利用限制性核酸内切酶和DNA聚合酶构建基因表达载体

C．将基因表达载体导入番茄体细胞之前需用Ca2+处理细胞

D．运用DNA分子杂交技术检测抗冻基因是否在番茄细胞中表达

科学家将绿色荧光蛋白(GFP)基因转入小鼠胚胎干细胞(ES)内，GFP基因若表达就会使细胞带有绿色荧光，继而利用带有绿色荧光的ES细胞培育出嵌合型的小鼠用于科学研究，流程如图所示。请回答：

(1)在步骤①中构建基因表达载体时，需要在GFP基因的首端加入____________酶识别和结合的部位，有了它才能驱动GFP基因转录出mRNA，最终获得GFP。GFP基因的尾端还需有_________，使转录在需要的地方停止下来。
(2)步骤②的受体细胞是小鼠ES细胞，ES细胞一般从囊胚的___________分离得到，且ES细胞在形态上表现为________________的特点。在培养ES细胞时，细胞充满培养皿底部后停止分裂，这种现象称为__________________。如果想继续培养则需要重新用__________处理，然后分瓶继续培养，这样的培养过程通常被称为____________________培养。
(3)图中重组囊胚在步骤⑤之前要先检测是否有绿色荧光细胞，再通过___________技术移入代孕母鼠子宫内继续发育。