CRISPR/Cas9系统基因编辑技术是近年来颇受关注的一项新技术。该基因表达系统主要包含引导RNA和Cas9蛋白两个部分，引导RNA能识别并结合特定的DNA序列，从而引导Cas9蛋白结合到相应位置并剪切DNA，最终实现对靶基因序列的编辑。研究人员试图用CRISPR/Cas9系统对水稻产量基因Q基因进行编辑，请回答下列问题：
（1）研究发现，CRISPR/Cas9仅存在于原核生物，故需借助____________技术才能在水稻细胞中发挥作用。Cas9蛋白与_____________酶的功能相似。
（2）首先依据___________的部分序列设计DNA片段A（负责编码相应引导RNA），再将片段A与含有Cas9基因的质粒B连接，以构建编辑水稻Q基因的CRISPR/Cas9系统基因表达载体（如图所示）。位点Ⅰ、位点Ⅱ分别表示_____________酶切位点。

（3）质粒B大小为2.5kb（位点Ⅰ与位点Ⅱ相隔60b），经酶切后的片段A大小为0.5kb（千碱基对），连接形成的表达载体大小为___________kb。
（4）常用农杆菌转化法将目的基因导入水稻受体细胞，依据农杆菌的侵染特点，目的基因将插入到Ti质粒的_______上，经过转化作用，进入水稻细胞，并将其插入到____________，从而使其得以维持稳定和表达。
（5）CRISRP/Cas9基因编辑技术有时存在编辑对象出错而造成脱靶，试从引导RNA的角度分析脱靶的原因_________________________________________________。

回答下列（一）（二）小题：
（一）柑橘汁在国内外市场上是最受人们欢迎的饮料之一。其大致的生产工艺流程如下：柑橘→选果与洗净→榨汁→过滤→果汁的调和→脱油和脱气→加热杀菌→装填和冷却。
（1）为提高柑橘的出汁率，榨汁时一般采用以下两种处理方式：一是加________处理，分解果肉组织中的果胶物质，提高出汁率；二是__________处理，使细胞原生质中的蛋白质凝固，改变了细胞的半透性，从而提高出汁率。
（2）果汁中含有3%～5%的果肉浆能给予果汁良好的色泽和浊度，但过量会使果汁粘稠化。检测柑橘汁中果肉浆含量是否合格，可采用比浊法，需要先绘制果肉浆含量与光密度值关系的______________，再通过测定样品柑橘汁的______________进行计算。
（3）工业生产中的果汁在装填之前需杀菌处理。柑橘的果汁pH一般都较低，因此杀菌时主要以______为杀菌对象。在微生物的分离、计数过程中，常采用_____________法接种，计数过程中统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为____________。
（二）从西非热带植物果实中提取的甜味蛋白质Brazzein是一种高甜度、低热值的新型非糖甜味剂。但是由于受到产地种植的限制等，难以实现Brazzein的大量生产。近几年人们引入生物工程方法获得甜味蛋白。如图是科学家培育能生产甜味蛋白质Brazzein乳腺生物反应器的过程，请回答相关问题：

（1）甜味蛋白质Brazzein基因，可采用PCR技术进行大量扩增，但前提是______________。过程①可采用动物病毒转染法，利用携带目的基因的病毒感染胚胎干细胞，实现对胚胎干细胞的__________。
（2）过程③通常从雌性小鼠的_______________中获取囊胚。过程④是将胚胎干细胞显微注射到小鼠的囊胚腔内形成嵌合体囊胚，将不同的基因转移、组合到嵌合体中，利用这一种方法可以解决________________的困难。
（3）过程⑤中要对受体小鼠进行_____________处理，得到的嵌合体小鼠的毛色为___________________。
（4）鉴定嵌合体小鼠是否成功表达甜味蛋白质Brazzein，可以利用_____________原理对小鼠乳汁中的特异性蛋白进行检测。

下图是某转基因抗虫水稻培育流程图,下列有关分析错误的是(    )

A．④过程依据细胞的全能性原理

B．毒蛋白基因的获得需要RNA聚合酶

C．①过程所依据的理论基础之一是DNA分子结构的相似性

D．该基因工程成功的标志是毒蛋白基因在宿主细胞中稳定维持和表达其遗传特性

阅读如下材料：
材料甲：科学家将人的生长激素基因导入母牛的体内，待母牛进入泌乳期后，变成了批量生产人生长激素的“乳腺生物反应器”。
材料乙：干扰素可用于治疗病毒感染和癌症，但在体外保存相当困难，科学家将其分子上一个半胱氨酸变成丝氨酸，在—70℃条件下可以保存半年。
回答下列问题：
（1）材料甲属于________工程的范畴。欲使转基因母牛仅在乳汁中含有人的生长激素，需在构建基因表达载体时将人生长激素基因与牛_______________________重组在一起，再将构建成功的基因表达载体导入小鼠的____________中（填细胞名称），常用的导入方法为_______________。
（2）材料乙属于___________工程范畴。该工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过__________或__________，对原有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质的技术。这是在基因工程基础是上延伸出来的第二代基因工程。我们为什么要进行蛋白质工程的研究呢？______________。

胰岛素是人体中唯一能降低血糖的激素，利用基因工程技术可以使人的胰岛素基因在酵母菌中进行表达，请回答下列基因工程有关问题：
（1）获取该目的基因常用的方法有_____________________和_______________。
（2）该技术的核心是胰岛素基因表达载体的构建，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够______________。基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因、_______________。其中，启动子是___________识别和结合的位点，可驱动转录出mRNA。
（3）该基因工程不选择大肠杆菌作为受体细胞，而是利用酵母菌的原因是________。
（4）检测胰岛素基因是否表达成功的方法是_________，提取的胰岛素应在________（填“高温”或“低温”） 条件下保存，原因是_______________。