下列过程中没有涉及碱基互补配对原则的是

A．提取目的基因

B．目的基因与运载体结合

C．将目的基因导入受体细胞

D．目的基因的表达和检测

生物工程具有广阔的应用前景。如图表示转基因番茄的生产过程，①～⑤为步骤。据图回答。

【小题1】在基因工程中，通常用同种限制酶切取目的基因和质粒，其目的是为了获得相同的____。过程①还需要另一种工具酶____处理。
【小题2】通过图中③④⑤过程，最终将番茄细胞培育成完整植株，这证明番茄细胞具有__。与多利羊的培育一样，将带有目的基因的番茄细胞培育成一个新个体的过程也不用雌、雄生殖细胞的结合，这种繁殖技术可称为______技术。
【小题3】转基因技术不仅应用于植物基因工程，还可应用于其他领域，例如_______和______。
【小题4】利用转基因技术可以培育出具有优良性状的生物，生产出人类所需要的产品。但转基因技术的安全性问题也一直备受关注，主要表现在_____等方面。
①转基因生物会对生态环境造成不利影响
②转基因农作物的人规模种植，降低了农作物的遗传多样性
③以转基因生物为原料加工生产的转基因食品中可能含有致敏物质会影响人类的健康
④转基因食品中的外源基因会整合到人的基因组中改变人的遗传信息

A．①②③

B．①②④

C．①③④

D．②③④

天然玫瑰因缺少控制合成蓝色色素的基因B而不能开蓝色花。科学家从开蓝色花的矮牵牛中了基因B后，利用生物工程技术培育出了开蓝色花的玫瑰。下图为该育种过程的操作流程。

注：Amp^r表示氨苄青霉素抗性基因，Tet^r表示四环素抗性基因。外源DNA插入到Amp^r或Tet^r中会导致相应的基因失活。限制酶EcoRⅠ、HindⅢ和BamHⅠ的识别序列及切割位点均不相同。
请回答下列问题：
（1）图中将基因B导入玫瑰细胞的方法称为_____________。选择Ti质粒作为运载体的原因是Ti质粒上的__________可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。
（2）在构建重组Ti质粒时，应选用图中的_________(限制酶）。有人用该种限制酶分别切割Ti质粒和基因B后混合，加入DNA连接酶进行反应，用得到的混合物直接转化细菌甲。结果得到了四种细菌甲：未被转化的、含环状基因B的、含Ti质粒的和含重组Ti质粒的。筛选目的细菌甲时，先用含_________的固体培养基培养，不能生长的是_________的细菌甲；然后再将能生长的细菌甲接种到含_________的固体培养基中，目的细菌甲在此培养基中___________(填“能”或“不能”）生长。
（3）由玫瑰韧皮部细胞形成组织乙的过程，实质是___________的过程。

研究人员将鱼的抗冻基因导入番茄体内，获得抗冻能力明显提高的番茄新品种。下列操作合理的是

A．设计相应DNA单链片段作为引物，利用PCR技术扩增目的基因

B．利用限制性核酸内切酶和DNA聚合酶构建基因表达载体

C．将基因表达载体导入番茄体细胞之前需用Ca2+处理细胞

D．运用DNA分子杂交技术检测抗冻基因是否在番茄细胞中表达

常见的酿酒酵母能利用葡萄糖，不能利用木糖发酵。若用转基因技术将发酵木糖的关键基因——木糖还原酶（XYL1）或木糖异构酶基因（XYLA）转入酿酒酵母中，均能培育出能利用木糖发酵产生酒精的酿酒酵母。图表示XYL1基因与细菌pYMILP质粒重组的过程示意图。图中AMP^r是氨苄青霉素抗性基因，其基因产物可使“碘—淀粉”复合物脱色，从而在含有“碘—淀粉”的固体平板上形成透明圈。转化成功的酿酒酵母中含AMP^r基因的重组质粒拷贝数越多，透明圈越大。

（1）据图可知，目的基因的长度是________________bp；图中获取目的基因和切割质粒所用的限制性核酸内切酶分别是___________、__________，最终能形成重组质粒的原因是________________。
（2）图是四个成功导入重组质粒的酵母菌的菌株（品系），在“碘—淀粉”的固体平板上的生长情况，其中目的基因表达量最高的是________，根据题意，分析原因是_____________________。此“碘—淀粉”培养基从功能上看属于_____________培养基。

（3）图是不同温度条件下重组酿酒酵母菌株的木糖异构酶活性。据图推测，此酶最初来自于（_______）

A．嗜热细菌

B．大肠杆菌

C．葡萄球菌

D．乳酸杆