2012年诺贝尔生理学或医学奖颁给了在细胞核重新编程领域有杰出贡献的两位科学家。科学家把c—Myc等4个关键基因通过逆转录病毒转入小鼠的成纤维细胞，使其变成未成熟的细胞—诱导多能干细胞即iPS细胞，而未成熟的细胞能够发育成机体内所有类型的细胞。
（1）题中的逆转录病毒相当于基因工程基本工具中的________；构建基因表达载体时对核苷酸序列有严格要求的工具酶是___________。
（2）目的基因进入受体细胞内，并且在其内维持稳定和表达的过程称为______________。基因工程技术所依据的原理是_________。
（3）若想增强病毒颗粒的感染性，可利用________________方法改造病毒外壳蛋白的结构，并最终通过对_______进行操作来完成。
（4）在培养过程中，要将成纤维细胞置于5%CO₂的气体环境中，CO₂的作用是_______________________________。
（5）iPS细胞在功能上类似于胚胎干细胞，则其在功能上的特点是______________________。iPS细胞的获得不使用胚胎细胞或卵细胞，也不诱导发育成个体，因此不会像生殖性克隆一样引发_____________问题。

图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题：

（1）图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由_________________________连接。
（2）若用限制酶Sma Ⅰ完全切割图1中DNA片段，其产物长度为_______________________
（3）若图1中虚线方框内的碱基对被T－A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从隐性纯合子分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶Sma Ⅰ完全切割，产物中共有_____种不同DNA片段。为了提高实验成功率，需要通过_____________技术扩增目的基因，以获得目的基因的大量拷贝。
（4）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是_____________。在导入重组质粒后，为了筛选出含质粒的大肠杆菌，一般需要用添加____________的培养基进行培养，用影印法接种到只含________________的培养基中培养，可进一步筛选出含重组质粒的受体细胞。
（5）假设用BamH Ⅰ切割DNA获取目的基因，用Mbo Ⅰ切割质粒，然后形成重组质粒，若将插入在抗生素B抗性基因处的目的基因重新切割下来，能否用BamH Ⅰ？为什么？___

下图是某转基因抗虫水稻培育流程图,下列有关分析错误的是(    )

A．④过程依据细胞的全能性原理

B．毒蛋白基因的获得需要RNA聚合酶

C．①过程所依据的理论基础之一是DNA分子结构的相似性

D．该基因工程成功的标志是毒蛋白基因在宿主细胞中稳定维持和表达其遗传特性

随着粮食需求量的增加和气候变化影响的不断加大，水稻的干旱脆弱性日益受到关注。据媒体报道，现在某理化研究所可持续资源科学中心正在开发一种全新的转基因水稻，其中导入了来自杂草拟南芥的GOLS2基因，使其更耐旱。GOLS2基因表达可提高植物细胞内糖类含量，降低植物叶片气孔开度。科研人员将拟南芥GOLS2基因导入并整合到水稻染色体上。请回答下列问题：
（1）从cDNA文库中获得的目的基因__________（填“含有”或“不含有”）启动子和终止子。通过PCR技术获取GOLS2基因的原理是________________，需设计____________种引物。
（2）GOLS2基因可以整合到水稻染色体上的遗传学物质基础是______________。需将GOLS2基因拼接在运载体上才能成功转化，转化指___________________。
（3）基因表达载体的组成除了GOLS2因外，还必须有___________________等；在构建基因表达载体过程中，常把两个启动子串联在一起形成双启动子，加在GOLS2因上游，双启动子的作用可能是__________________________，进一步提高细胞内糖类含量。

珙桐（2n=40）被称为植物活化石，为进一步保护珙桐，保护生物的多样性。2015年中科院国家重点实验室科研小组来到贵州梵净山珙桐保护基地采集了珙桐材料进行相关的研究。回答问题：
（1）为增强珙桐抗虫特性，科学家需要将苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因导入珙桐中，使珙桐的抗药性增强。①用______________酶获取目的基因；②将目的基因导入珙桐细胞；③将受体珙桐细胞进行植物组织培养获得抗药幼苗，其原理是______________；④目的基因的检测。
（2）目的基因一般只导入受体细胞同源染色体的一条上，可将含有目的基因的植株看成杂合子（Aa）。现有一通过基因工程获得的具有抗虫性状的珙桐幼苗（Aa），为了获得能够稳定遗传的抗虫植株，可采用多种育种方法，其中最简单的方法是是进行____________，育种年限最短的是进行____________。若对该植株先用秋水仙素处理转变成基因型为AAaa的四倍体，再经过花药离体培养也能获得稳定遗传的子代，其中秋水仙素的作用是_____________，符合要求的子代比例是_____________。
（3）研究发现，珙桐植株的另一对同源染色体上，显性基因B会抑制抗虫基因A的表达，使得珙桐不具有抗虫性状。若用没有抗虫性状的植株AaBb的基因型植株自交，子代表现型及比例为__________。