研究人员将鱼的抗冻基因导入番茄体内，获得抗冻能力明显提高的番茄新品种。下列操作合理的是

A．设计相应DNA单链片段作为引物，利用PCR技术扩增目的基因

B．利用限制性核酸内切酶和DNA聚合酶构建基因表达载体

C．将基因表达载体导入番茄体细胞之前需用Ca2+处理细胞

D．运用DNA分子杂交技术检测抗冻基因是否在番茄细胞中表达

下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，不正确的是（   ）

A．①→②利用两种不同限制酶处理，能避免含抗虫基因的DNA片段自身环化

B．②→③可用氯化钙处理农杆菌，有助于促进重组Ti质粒转化到农杆菌细胞中

C．③→④用农杆菌侵染植物细胞，重组Ti质粒整合到植物细胞的染色体上

D．④→⑤用植物组织培养技术培养，利用了植物细胞的全能性

科学家在培育抗虫棉时，经过了许多复杂的过程和不懈的努力，才获得成功。起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中，然后导入棉花的受精卵中，结果抗虫基因在棉花体内没有表达。然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗虫基因首端)，导入棉花受精卵，长成的棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子(抗虫基因末端)导入棉花受精卵，结果长成的植株有抗虫能力。由以上过程推知，作为重组载体除了标记基因外，还应具备的结构是

A．目的基因、启动子	B．目的基因、终止子
C．启动子、终止子	D．目的基因、启动子、终止子

利用现代生物技术可对生物进行改造。例如：
①从某细菌中获取抗虫基因，并与质粒运载体拼接成重组DNA，导入棉花的愈伤组织细胞内，经培养、筛选和培育获得抗虫棉品种；
②将人胰岛素基因与质粒运载体才并接成重组DNA，再导入某种细菌细胞内，大量培养该种细菌，以生产医用的人胰岛素；
③取某种植物花粉，先组织培养形成完整桂林，再用秋水仙素处理，使之染色体加倍；
④将大鼠的生长激素基因与质粒运载体拼接成重组DNA，注射入小鼠的受精卵内，体外培养该受精卵使之发育到一定的胚胎阶段后，移植入代孕小鼠体内，产生“超级小鼠”； 
⑤取转基因抗冻番茄叶片经组织培养，产生再生植株，达到快速繁殖抗冻番茄的目的。根据上述材料回答问题。
【小题1】上述例子中，用到基因工程技术的有____________（填序号）。目的基因除了人工合成外，
还可通过________方法获取，拼接重组DNA的步骤中，都需要用到限制性内切酶和____________酶。
【小题2】与杂交的方法相比用例③中方法得到纯合子所需时间____________（较短/较长/相同）；用例⑤中所用方法大量去繁殖抗冻番茄时，抗冻基因____（更容易/不容易/一样容易）丢失。
【小题3】上述例子中，需要用到植物组织培养技术的有____________（填序号），植物组织培养技术的基本原理是植物活细胞具有______。

如图为某生物工程操作流程模式图,下列说法正确的是（　　）

A．若此图表示基因工程的操作流程,若A为质粒,则B表示重组DNA分子

B．若此图表示动物细胞融合过程,则形成C(杂种细胞)的原理是细胞全能性

C．若此图为试管牛生产的技术流程图,则获得A(精子)后可直接与B进行体外受精

D．若此图为试管婴儿的培育过程,则包括体外受精、细胞培养和胚胎移植等方面