资料一：PCR（聚合酶链式反应）三个基本反应步骤是模板DNA在体外加热至95℃时解旋成单链，温度降至55℃左右，引物与模板单链按碱基互补配对的原则结合，再调至72℃左右时，DNA聚合酶沿5′→3′（磷酸到五碳糖）的方向延伸引物合成互补链。三个步骤完成一次称为一个循环。
资料二：图1显示了目的基因及其上限制酶切点，A、B、C、D是四种单链DNA片段；图2是质粒（显示限制酶切点和标记基因），一般来说，为了使切割后的目的基因与运载体结合，往往使用两种限制酶，同时还要破坏载体上的一个标记基因。根据资料回答下列问题：

（1）若利用PCR技术增加目的基因的数量，所用的酶是__________。由图1可知，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取__________作为引物，该DNA分子在PCR仪中经过4次循环后会产生DNA片段__________个。
（2）为了提高目的基因和质粒的重组成功率，同时有利于受体细胞的筛选，应该选择的限制酶是________。如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切割且每次机会相等，则形成的含有完整抗四环素基因的DNA片段有__________种。
（3）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是__________。
（4）对基因组文库的描述，不正确的是__________。

A．含有某种生物的全部基因	B．基因中含有启动子和内含子
C．文库的基因是通过受体菌承载的	D．文库中的全部基因可以在物种间交流

生物工程具有广阔的应用前景。如图表示转基因番茄的生产过程，①～⑤为步骤。据图回答。

【小题1】在基因工程中，通常用同种限制酶切取目的基因和质粒，其目的是为了获得相同的____。过程①还需要另一种工具酶____处理。
【小题2】通过图中③④⑤过程，最终将番茄细胞培育成完整植株，这证明番茄细胞具有__。与多利羊的培育一样，将带有目的基因的番茄细胞培育成一个新个体的过程也不用雌、雄生殖细胞的结合，这种繁殖技术可称为______技术。
【小题3】转基因技术不仅应用于植物基因工程，还可应用于其他领域，例如_______和______。
【小题4】利用转基因技术可以培育出具有优良性状的生物，生产出人类所需要的产品。但转基因技术的安全性问题也一直备受关注，主要表现在_____等方面。
①转基因生物会对生态环境造成不利影响
②转基因农作物的人规模种植，降低了农作物的遗传多样性
③以转基因生物为原料加工生产的转基因食品中可能含有致敏物质会影响人类的健康
④转基因食品中的外源基因会整合到人的基因组中改变人的遗传信息

A．①②③

B．①②④

C．①③④

D．②③④

英国的科学家利用转基因技术培育出含有大鼠生长激素基因的巨型小鼠，如图是制备转基因小鼠的操作过程。图中编号表示过程，A～D表示限制酶，字母下方的斜线指向的是相应的酶切位点。

【小题1】图中过程① 需要用到的限制酶是___________ 和___________；过程②所用到的酶是___________。
【小题2】图中过程③ 所用方法是___________，受体细胞一般采用___________细胞。得到巨型小鼠后，可取其体细胞核，采用___________进行繁育。
【小题3】从转基因生物的安全性方面考虑，上述转基因小鼠研究必须在限定范围内进行，这一做法的目的是防止____________基因向其他生物扩散。

CAR-T细胞疗法是通过设计CAR基因，并导入癌症患者的T细胞中，使其转化为CAR-T细胞，CAR-T细胞膜上的CAR蛋白与癌细胞表面抗原特异结合后，激活CAR-T细胞使其增殖、分化，从而实现对癌细胞的特异性杀伤和记忆，主要过程如下图。请回答：

(1)过程①中，需要先要用____切割不同的DNA片段形成黏性末端，再利用____连接形成CAR基因。
(2)将CAR基因导入患者T细胞前，必须先完成过程②，一是因为CAR基因片段小，在细胞中容易丟失;二是因为缺少____，CAR基因在T细胞中不能复制。
(3)完成过程③常用方法是____。此外，还可以先将CAR基因整合到逆转录病毒载体中，再利用病毒的____性导入并将CAR基因整合到T细胞的____上。
(4)根据图示，CAR-T细胞对癌细胞的特异性杀伤主要取决于CAR蛋白____区。CAR-T细胞疗法具有持久性是因为CAR-T细胞能够在体内____。

下列过程中没有涉及碱基互补配对原则的是

A．提取目的基因

B．目的基因与运载体结合

C．将目的基因导入受体细胞

D．目的基因的表达和检测