随着粮食需求量的增加和气候变化影响的不断加大，水稻的干旱脆弱性日益受到关注。据媒体报道，现在某理化研究所可持续资源科学中心正在开发一种全新的转基因水稻，其中导入了来自杂草拟南芥的GOLS2基因，使其更耐旱。GOLS2基因表达可提高植物细胞内糖类含量，降低植物叶片气孔开度。科研人员将拟南芥GOLS2基因导入并整合到水稻染色体上。请回答下列问题：
（1）从cDNA文库中获得的目的基因__________（填“含有”或“不含有”）启动子和终止子。通过PCR技术获取GOLS2基因的原理是________________，需设计____________种引物。
（2）GOLS2基因可以整合到水稻染色体上的遗传学物质基础是______________。需将GOLS2基因拼接在运载体上才能成功转化，转化指___________________。
（3）基因表达载体的组成除了GOLS2因外，还必须有___________________等；在构建基因表达载体过程中，常把两个启动子串联在一起形成双启动子，加在GOLS2因上游，双启动子的作用可能是__________________________，进一步提高细胞内糖类含量。

胰岛素是人体中唯一能降低血糖的激素，利用基因工程技术可以使人的胰岛素基因在酵母菌中进行表达，请回答下列基因工程有关问题：
（1）获取该目的基因常用的方法有_____________________和_______________。
（2）该技术的核心是胰岛素基因表达载体的构建，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够______________。基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因、_______________。其中，启动子是___________识别和结合的位点，可驱动转录出mRNA。
（3）该基因工程不选择大肠杆菌作为受体细胞，而是利用酵母菌的原因是________。
（4）检测胰岛素基因是否表达成功的方法是_________，提取的胰岛素应在________（填“高温”或“低温”） 条件下保存，原因是_______________。

利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是

A．棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因

B．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA

C．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列

D．酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白

水稻是我国最重要的粮食作物。稻瘟病是由稻瘟病菌（Mp）侵染水稻引起的病害，严重危害我国粮食生产安全。与使用农药相比，抗稻瘟病基因的利用是控制稻瘟病更加有效、安全和经济的措施。现有甲（R₁R₁r₂r₂r₃r₃）、乙（r₁r₁R₂R₂r₃r₃）、丙（r₁r₁r₂r₂R₃R₃）三个水稻抗病品种，抗病（R）对感病（r）为显性，三对抗病基因位于不同染色体上。根据基因的 DNA 序列设计特异性引物，用 PCR 方法可将样本中的 R₁、r₁、R₂、r₂、R₃、r₃ 区分开。这种方法可用于抗病品种选育中基因型的鉴定。并且研究发现，水稻的抗病表现不仅需要自身抗病基因（R₁、R₂、R₃等）编码的蛋白，也需要 Mp 基因（A₁、A₂、A₃等）编码的蛋白。只有 R 蛋白与相应的 A 蛋白结合，抗病反应才能被激活。

用甲品种与感病品种杂交后，对F₂不同植株的 R₁、r₁进行 PCR 扩增。已知 R₁比r₁ 片段短。如下为扩增结果。请分析选项中正确的是：

A．水稻种植区的 Mp 是由不同基因型组成的群体。大面积连续种植某个含不同抗病基因的水稻品种，将会引起 Mp 种群基因频率改变，使该品种抗病性逐渐减弱直至丧失，无法在生产中继续使用

B．为了在较短时间内将甲、乙、丙三个品种中的抗病基因整合，选育新的纯合抗病植株，育种步骤的正确排序是先将甲×乙，得到F1R1r1R2r2r3r3植株×丙，得到不同基因型的子代，再用 PCR 方法选出 R1R1R2R2R3R3植株

C．若基因型为 R1R1r2r2R3R3和 r1r1R2R2R3R3的水稻，被基因型为 a1a1A2A2a3a3的 Mp侵染，推测这两种水稻的抗病性表现依次为抗病、感病

D．研究人员每年用 Mp（A1A1a2a2a3a3）人工接种水稻品种甲（R1R1r2r2r3r3），几年后甲品种丧失了抗病性，检测水稻的基因未发现变异。推测甲品种抗病性丧失的原因是 Mp 的A1基因发生了突变。

科研人员利用大肠杆菌构建了抗虫基因文库。最新研究发现漏斗蜘蛛中的AH基因控制合成的毒素肽具有显著的杀虫效果，现以p-B质粒为载体，构建AH基因的cDNA文库。图1表示p-B质粒，其中Cm!r表示氯霉素抗性基因，ccdB 基因表达产物能抑制大肠杆菌DNA复制。图中箭头表示相关限制酶的酶切位点，且不同种限制酶识别序列不同，其中Aiu I、Xba I、Ssp I和Mfe I识别的碱基序列和酶切位点分别是AGLCT、T4CTAGA、AATIATT、 CIAATTG。请分析回答：

（1）为获得AH基因的cDNA，先要从漏斗蜘蛛毒素肽分泌细胞中提取_________，再利用反应体系中添加__________，从而准确合成出AH基因的cDNA，排除其他提取物的干扰。若从漏斗蜘蛛其他组织细胞提取，则难以成功，原因是其他组织细胞中_________。
（2）利用图中的质粒和AH基因构建重组质粒时，宜选用________双酶切质粒，再选用_________切割目的基因，将切割后获得的DNA片段混合，经DNA连接酶处理后，再与大肠杆菌混合培养，在含有适量氯霉素的培养基中添加适量冷冻的________，以促进转化。
（3）经上述处理培养后，获得存活的大肠杆菌中应含有的质粒是________，原因是_________。