生物技术实践与人们生产和生活密切相关。回答下列有关问题：
（1）无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌污染。常用的灭菌方法有________________(答三种方法）。
（2）在生产葡萄酒的过程中，发现葡萄酒变酸，表面观察到菌膜，造成此现象的生物是________________。腐乳外部有一层致密的“皮”,这是________________的匍匐菌丝形成的。
（3）在制作果醋过程中，榨取的果汁非常浑浊，解决方法是_______________________________。
（4）提取洋葱DNA时，要在切碎的洋葱中加入一定的________________，并进行充分地搅拌和研磨，待过滤后再收集研磨液。
（5）橘皮精油的提取方法不采取水中蒸馏法，是因为该方法会导致_______________等问题。

大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一类细菌，含有2000种以上的蛋白质；大肠杆菌的数量是检测自来水是否受粪便污染的最直接的指标。
回答下列问题：
(1)利用凝胶色谱法分离提取到的部分大肠杆菌蛋白质时，等样品完全进入凝胶层后，加入pH为7.0、浓度为20mmOl/L的________到适当高度进行洗脱，结果甲蛋白质先洗脱出来，乙蛋白质后洗脱出来，则相对分子质量较大的是______________蛋白质。
(2)通过滤膜法可以测定自来水中大肠杆菌的数目：一定体积的自来水样过滤后，将滤 膜放在伊红-美蓝培养基（主要成分包括：蛋白胨、NaCl、琼脂、乳糖、伊红和美蓝水溶液）上培养，大肠杆菌的代谢产物能与伊红-美蓝反应，使菌落呈黑色。根据培养基上菌落的数目，计算出大肠杆菌的数量。
①伊红-美蓝培养基属于_____(填“选择”或“鉴别”)培养基，蛋白胨的作用有_____(答出两点即可）。
②培养大肠杆菌时，在接种前通常需要检测固体培养基是否被污染，检测方法是______。
③用滤膜法进行测定时，滤膜的孔径应 _______(填“大于”或“小于”）大肠杆菌。滤膜法是根据培养基上菌落的数目来推测样品中的活菌数，其原理是___。

某小组同学研究饭后剩余米汤中细菌数量随时间的变化，他们每过半小时取样一次，采用平板培养法进行计数。请回答下列问题：
（1）根据研究目的应采用______法接种，接种前需先对样本进行______操作。
（2）为了保证所有种类的细菌均能生长，所用培养基应包括的营养要素有______。
（3）随后该组同学对筛选出的所有细菌进行再培养研究，他们往培养基中加入一定量的青霉素这种培养基可叫做______培养基，从而可分离出______的细菌。
（4）酿酒利用的微生物主要是______，该生物在______条件下分解糖类产生酒精。酿醋利用的微生物主要是______。

酵母菌是真核生物，在人类文明史中被应用的最早的微生物，现今被广泛应用于人们的生活和生产中。请回答下列与酵母菌有关的问题：
(1)在测定土壤中微生物的数量时，酵母菌选用10²、10³、10⁴倍的稀释液进行平板培养，而细菌一般用10⁴、10⁵、10⁶倍的稀释液进行，原因是________________________。纯化的菌株如需短时间保存则将菌种接种到_________________培养基上，并置于4℃冰箱保存。
(2)制备固定化酵母细胞的实验步骤是：酵母细胞的活化→配制CaCl₂溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。
①影响实验成败的关键步骤是_____________________________________。观察形成凝胶珠的颜色和形状，如果颜色过浅，说明_____________________________。实验中CaCl₂溶液的作用是___________________________________________________。
②固定酵母细胞的方法属于_____________________法，一般固定酶时不采用这种方法，原因是_____________