下列过程中没有涉及碱基互补配对原则的是

A．提取目的基因

B．目的基因与运载体结合

C．将目的基因导入受体细胞

D．目的基因的表达和检测

细菌常常作为基因工程的受体细胞，下列理由充分的是( )

A．形体微小

B．结构简单

C．容易监测

D．繁殖速度快

1978年，人类首次利用转基因技术生产出人胰岛素，其过程大致如图所示：

（1）人胰岛素由A、B两条肽链组成，可根据组成肽链的氨基酸序列，确定编码胰岛素基因的碱基序列，因此可通过____________方法获得目的基因。
（2）β- 半乳糖苷酶能将无色ONPG分解，产物呈黄色，本生产流程中β- 半乳糖苷酶基因作为___________，通过①和②，完成基因表达载体的构建，写出该过程处理DNA分子所需要的酶：________________________________。
（3）③表示将表达载体导入受体细胞，用Ca²⁺处理大肠杆菌，目的是使之变为____________细胞，利于外源DNA侵染，④表示利用化学方法催化二硫键的形成，合成具有生物活性的胰岛素，人体内该过程在胰岛B细胞的_________中进行。

回答下列有关基因工程、细胞工程、胚胎工程、生态工程的问题。
（1）外源基因整合到小鼠胚胎干细胞的DNA序列中，使某一个基因被取代或破坏而失活，形成杂合体细胞，然后将其植入小鼠的早期胚胎，生成嵌合体小鼠，嵌合体小鼠的生成涉及到的生物工程技术手段有_______、________、_______等
（2）“试管婴儿”是指精子和卵子在试管内进行结合的体外受精技术，受精前精子需要事先经过________处理，常采用的方法有_________________________________，卵子要培养到_________________（时期）。
（3）生态经济主要是通过实行“__________”的原则，使一个系统产出的污染物，能够成为本系统或者另一个系统的___________，从而实现废弃物的资源化。

英国的科学家利用转基因技术培育出含有大鼠生长激素基因的巨型小鼠，如图是制备转基因小鼠的操作过程。图中编号表示过程，A～D表示限制酶，字母下方的斜线指向的是相应的酶切位点。

【小题1】图中过程① 需要用到的限制酶是___________ 和___________；过程②所用到的酶是___________。
【小题2】图中过程③ 所用方法是___________，受体细胞一般采用___________细胞。得到巨型小鼠后，可取其体细胞核，采用___________进行繁育。
【小题3】从转基因生物的安全性方面考虑，上述转基因小鼠研究必须在限定范围内进行，这一做法的目的是防止____________基因向其他生物扩散。