p53基因是人体内一种抑癌基因．该基因编码的p53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变．“今又生”是我国首创的基因治疗药物之一，是世界首个获准上市的基因治疗药物，其核心成分是利用腺病毒和人p53基因拼装得到的重组病毒．“今又生”药物中的腺病毒经基因工程改造后，在宿主细胞内不能复制，不能整合到染色体上．请回答下列问题：

（1）将p53基因与腺病毒拼装成重组病毒，需要用到的工具酶有____ ．常用的基因工程载体除动植物病毒外，还有____ ．

（2）限制酶能将特定序列的核苷酸之间的____ 键切开，形成____ 末端．

（3）在“今义生”的生产中，科学家选择性地放弃了一般载体都应该具有的____ ，以获得更高的安全性能．p53基因应插入载体的____ 之间，以便于基因的表达．

（4）p53基因的大量扩增可以采用PCR技术，该技术中需使用的一种特殊的酶是____ ．如图是需要扩增的p53基因在DNA中的位置示意图，扩增过程需要____ 种引物．n次循环之后，只含目的基因的片段占所有扩增产物的比例为　____ 　．