如图所示,pIJ702是一种常用质粒,其中
tsr为硫链丝菌素(一种抗生素)抗性基因,
mel是黑色素合成基因,其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落;而限制酶
CLa I、
Bgl II、
Pst I、
Sac I、
Sph I在pIJ702上分别只有一处识别序列。

(1)质粒DNA分子中的两条链靠__________键维系成双链结构。
(2)以
Sac I和
Sph I切取的目的基因置换pIJ 702上0.4kb(1kb=1000对碱基)的
Sac I/
Sph I片段,构成重组质粒pZHZ8。上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在表1中。由此判断目的基因内部是否含有
Bgl II切割位点__________,说明判断依据__________。
(3)已知pIJ 702上含
mel基因的
Cla I/
Pst I区域长度为2.5kb,若用
Cla I和
Pst I联合酶切pZHZ8,则参照表1数据可断定酶切产物中最小片段的长度为__________kb。
(4)不含质粒的链霉菌在含硫链丝菌素固体培养基上的生长状况如下表2所示。若要筛选接纳了pIJ 702或pZHZ8的链霉菌细胞,所需的硫链丝菌素最小浓度应为__________

g/mL(填写表格中给定浓度);含有重组质粒pZHZ8的菌落呈______色。

(5)上述目的基因于原核生物,其蛋白质编码序列(即编码从起始密码子到终止密码子之间的序列)经测定为1256对碱基,试判断对这段序列的测定是否存在错误__________,并说明依据__________。