现代生物工程技术
AET（α-氨基酸酯酰基转移酶）催化丙氨酸、谷氨酰胺合成的丙谷二肽可预防和治疗某些疾病，因此利用生物技术规模化生产AET具有重要意义。图1 表示所用质粒、某菌拟核DNA中的AET基因，以及限制酶Smal、BamHI、EcoRⅠ和HindⅢ的切割位点，且这四种限制酶切割形成的末端序列各不相同。


（1）AET催化丙谷二肽合成过程中形成的化学键是______。
（2）质粒的化学本质是______。为了AET与质粒DNA合理重组，拟核DNA和质粒均应用______（限制酶）切割。
利用重组质粒改造大肠杆菌并规模化生产、分离提纯AET的技术流程如图2所示。
（3）图2中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并获取单菌落是图中的过程______。筛选所用培养基除含微生物所需要的营养成分外，还必须添加的物质有______。
A．伊红美蓝 B．氯霉素 C．丙氨酸 D．谷氨酰胺
（4）上述改造大肠杆菌并将之用于AET的大规模化生产，涉及______（多选）。
A．细胞工程 B．基因工程 C．酶工程 D．发酵工程
（5）图3表示pH对AET酶活性的影响。将酶置于不同pH下足够长的时间，再在最适pH下测其酶活性，由此得到pH对AET酶稳定性的影响，如图4所示。据图3和图4判断该酶使用的最佳pH范围是______，写出分析过程：______。