（在研究温度对某种酶活性的影响时，可以通过一种指示剂来追踪反应物分解过程（指示剂最初为红色，当反应物完全被分解后，指示剂就会变成黄色）。各试管的实验处理和一段时间后的结果见下表。回答下列问题：

试管号	温度（℃）	指示剂初始颜色	指示剂最终颜色
1	0	红色	红色
2	10	红色	橘黄色
3	40	红色	黄色
4	60	红色	橘黄色
5	100	红色	红色

 
（1）本实验的自变量是温度，无关变量有pH、___（写出2种）等。
（2）在表中___（填温度）条件下，该酶的活性最高。要鉴定该酶的化学本质是否为蛋白质，可选用___试剂进行实验。
（3）1号试管中的指示剂颜色没有改变的原因是___。
（4）为了进一步确定该酶的最适温度，需要在表中____（填温度范围）设置更小的温度梯度进行探究。