在基因工程的操作过程中，获得重组质粒不需要（    ）

①DNA连接酶　

②同一种限制酶　

③RNA聚合酶　

④具有标记基因的质粒　

⑤目的基因　

⑥4种脱氧核苷酸

A：③⑥

B：②④

C：①⑤

D：①②④