酶在大规模产业化应用的生产中，首先需分离提纯获得酶制剂．下列正确表示分离提纯流程的是（　　）

①破碎细胞   ②层析提纯   ③过滤   ④冷冻干燥结晶．

A：①→③→②→④

B：①→②→③→④

C：①→③→④→② 

D：①→④→③→②