鉴定分解纤维素的微生物要用刚果红染色，加入刚果红的操作可在（　　）

①制备培养基时　②梯度稀释时　③倒平板时  ④涂布时  ⑤培养基上长出菌落时．

A：①③

B：②⑤

C：③⑤

D：④⑤