以下哪一组实验材料必须自始至终保持在生活状态下的是（   ）  
①观察植物细胞有丝分裂            ②观察植物细胞的质壁分离和复原 
③用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体  ④叶绿体中色素的提取和分离
⑤探究酵母菌细胞呼吸的方式                 

A：①②③

B：②③④

C：②③⑤

D：①④⑤