在孟德尔的豌豆杂交实验中，必须对母本采取的措施是（　　）

①开花前人工去雄  ②开花后人工去雄 

③去雄后自然授粉  ④去雄后人工授粉 

⑤授粉后套袋隔离  ⑥授粉后自然发育．

A：①③⑤

B：②④⑥

C：①③⑥

D：①④⑤