三羟基异黄酮(简称GST)是从豆科植物根部分离得到的一种天然产物.它具有显著的抗癌、抑菌、抗氧化等作用.经研究发现:GST可通过影响细胞凋亡基因(Bcl﹣2基因和Bax基因)的表达而诱导癌细胞凋亡.科研人员为研究GST对鼻咽癌细胞的影响和作用机制,进行了以下实验.请完善实验并分析回答相关问题.
实验步骤:
(1)取5个相同的培养瓶,编号A、B、C、D、E,分别加入等量的培养液.向A瓶接种正常细胞,B、C、D、E瓶接种____ .
(2)向C、D、E瓶中分别加入____ 、____ 、____ μmol/L GST溶液.其他培养条件相同且适宜.
(3)培养一段时间后,检测并统计____ ,结果记录于表1.
(4)重复上述步骤,检测、统计,____ 结果记录于表2.
表1 | Bcl﹣2基因表达率 | Bax基因表达率 |
正常细胞 | 不表达 | 全部表达 |
鼻咽癌细胞 | 90% | 19% |
5μmol/L GST干预组 | 75% | 58% |
10μmol/L GST干预组 | 49% | 67% |
15 μmol/L GST干预组 | 22% | 85% |
表2 | 鼻咽癌细胞凋亡率 |
5μmol/L GST干预组 | 15.72% |
10μmol/L GST干预组 | 27.33% |
15 μmol/L GST干预组 | 35.48% |
分析与讨论
①表1数据说明:从基因水平上看,GST诱导鼻咽癌细胞凋亡与Bcl﹣2基因和Bax基因的表达有关.当Bcl﹣2蛋白/Bax蛋白的比值出现____ 趋势时,会诱导鼻咽癌细胞凋亡.
②表2数据说明GST可诱导鼻咽癌细胞凋亡,且与____ 有关.
③培养动物细胞要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织,而培养癌细胞不需要相关酶处理的原因是癌细胞膜上的____ 等物质减少,易游离而从癌组织转移出去.