如图是微生物平板划线示意图．划线的顺序为1、2、3、4、5．下列操作方法正确的是（ ）

A：操作前要将接种环放在火焰旁灭菌

B：划线操作须在火焰上进行

C：在5区域中才有可能得到所需菌落

D：在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环进行灭菌