胚胎干细胞（ES细胞）在生物学研究中具有十分重要的应用价值．

（1）图为某科研小组采用“基因靶向”技术先将小鼠的棕褐毛色基因导入黑色纯种小鼠的ES细胞中，再将改造后的ES细胞移植回囊胚继续发育成小鼠的过程．在目的基因获取和基因表达载体构建过程中使用的工具酶有____ ．

（2）图中完成第Ⅱ步操作得到由两个DNA切段连接成的产物有____ 种重组DNA分子；第Ⅲ步操作后，还需经过____ 的过程，才能将该ES细胞注射到囊胚中．

（3）ES细胞在功能上具有____ 的特点；目前研究人员正尝试通过科技手段利用ES细胞经过特殊诱导，为因故失去手的患者提供新的“手”，该过程揭示了细胞____ 的机理．

（4）已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断，一般情况下，细胞中有D或S途径即能分裂增殖．人淋巴细胞中虽然有这两种DNA合成途径，但一般不分裂增殖．鼠ES细胞中只有D途径，但能不断分裂增殖．将这两种细胞在试管中混合，加____ 促融，获得杂种细胞．若要从培养液中分离出杂种细胞，写出实验方法（不考虑机械方法），并说明理由．

方法：____．

理由：____ ．

火眼金睛：选择下列说法正确的一项（ ）​

如图，在平面直角坐标系中，直线 $y=-3x+3$ 与 $x$ 轴、 $y$ 轴分别交于A、B两点，以AB为边在第一象限作正方形，点D恰好在双曲线上 $y=\frac{k}{x}$ ，则 $k$ 值为____．