以下哪一组实验材料必须自始至终保持在生活状态下：                         （   ）
①观察植物细胞有丝分裂                        ②观察植物细胞的质壁分离和复原
③用高倍显微镜观察叶绿体                    ④叶绿体中色素的提取和分离
⑤探究酵母菌细胞的呼吸方式

A：①②

B：②③

C：②③⑤

D：①②③④