限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶，以下说法正确的是  (　　)

A．DNA连接酶能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键

B．限制酶只能切割双链DNA片段，不能切割烟草花叶病毒的核酸

C．E·coli DNA连接酶既能连接黏性末端，也能连接平末端

D．限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，所以也能剪切自身的DNA

基因工程不需要用到的工具是（   ）

A．限制酶

B．转运RNA

C．载体

D．DNA连接酶

人血清白蛋白(HSA) 具有重要的医用价值，只能从人血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径。

（1）为获取HSA基因，首先需采集人的血液，提取_____________合成总cDNA，然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因。下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向，请用箭头在方框内标出另一条引物的位置及扩增方向。

（2）启动子通常具有物种及组织特异性，构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体，需要选择的启动子是_____________（填写字母，单选）。

A．人血细胞启动子

B．水稻胚乳细胞启动子

C．大肠杆菌启动子

D．农杆菌启动子

（3）利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，需添加酚类物质，其目的是____________。
（4）人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才有活性。与途径Ⅱ相比，选择途径Ⅰ获取rHSA的优势是____________________________________。
（5）为证明rHSA具有医用价值，须确认rHSA与_________________的生物学功能一致。

下列哪项不是基因工程的基本工具（   ）

A．基因的“剪刀”

B．基因的“针线”

C．基因的运载体

D．RNA聚合酶

某基因研究院培育出了转基因克隆绵羊，该绵羊能合成深海鱼体内富含的不饱和脂肪酸 omega—3。
（1）目前，基因工程中使用的限制酶主要是从________生物中分离纯化获得的。构建“基因组文库”和“cDNA 文库”的过程中需要使用 DNA 连接酶的是____________(填基因组文库、cDNA 文库或基因组文库和 cDNA 文库）。
（2）在培育转基因克隆绵羊过程中，运用________方法除去卵母细胞的细胞核，通过化学试剂________使该细胞与供体细胞融合，进而构建重组胚胎。
（3）培育过程中，科研人员将 omega—3 合成酶的基因片段转移到了该羊基因组中使其发生进行转化，转化指的是_______________________。利用 PCR 技术进行扩增目的基因的前提是_______________________   。
（4）建造海底人工鱼礁，其目的是改善海洋环境，是实现海洋渔业可持续发展的举措之一，这体现了生态工程所遵循的    __________ 原理。十九大提出“绿水青山就是金山银山”，要实现这一目标不仅需要对破坏的生态环境进行恢复，还要考虑当地人的经济发展和生活需要，这主要遵循了生态工程的____原理。