下列关于生物工程相关知识的叙述，正确的是
①在基因工程操作中为了获得重组质粒，可以用不同的限制性内切酶切割质粒和目的基因，但露出的黏性末端必须相同
②只要B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，就能产生单克隆抗体
③蛋白质工程的目标是通过基因重组，合成生物体本来没有的蛋白质
④太空育种获得的植株也存在与转基因植物一样的安全性问题
⑤生态农业使废物资源化，提高能量的传递效率，减少了环境污染
⑥诱导细胞融合之前，需将抗原反复注射给实验小鼠，目的是获得产生单一抗体的浆细胞

A．③⑥

B．①⑥

C．③④

D．②③⑥

回答下列（一）（二）小题：
（一）回答与固定化酶相关的问题：
（1）常用固定化果胶酶处理含果胶的污水，其主要优点有___________________，果胶酶可以在_______________等微生物体内找到，酶的固定化方法除了包埋法外，还包括______________、交联法、共价偶联法等。
（2）科研人员用海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶，以硏究固定化酶的相关性质和最佳固定条件。酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶活性和酶的数量。如图甲、乙为部分研究结果。分析并回答相关问题

①由图甲可知，固定化小麦酯酶的最适宜温度是_______________。
②由图甲和图乙可知，酶对有机溶剂不敏感，但对______________和______________非常敏感。
③用固定化酶技术与微生物降解相比，其作用不需要适宜的（_______）

A．温度	B．酸碱度
C．水分	D．营养

（二）回答与基因工程和动物克隆有关的问题：
（1）可利用______________方法检测某人体内是否有抗体，从而判断某人是否被冠状病毒感染。
（2）上海多家生物公司已研发出冠状病毒检测试剂盒。该方法采用RT-PCR技术对病毒抗原进行检测。2019新型冠状病毒是RNA病毒，应该先用______________将RNA逆转录为cDNA。再设计引物进行PCR扩增检测。
（3）2020年1月10日，科学家完成病毒基因组测序，经科学家初步研究发现冠状病毒核衣壳N蛋白具有特异抗原性。因此可用____________获取目的基因，利用____________与表达载体构建成重组DNA分子。导入经____________处理的受体细菌，诱导表达后分离纯化核衣壳N蛋白作为抗原。
（4）将核衣壳N蛋白注射到小鼠体内，获取经免疫的脾细胞，再与小鼠的_____________融合，经筛选获得杂交瘤细胞系。再经____________培养法筛选岀杂交瘤细胞株。经体内或体外扩増培养，获得单克隆抗体。此抗体优点是___________________________________________________。

2019年“生物谷”发文称“在人类癌症患者中，癌细胞与免疫细胞融合在一起”，在一项新的研究中，来自美国俄勒冈健康与科学大学的研究人员在癌症小鼠模型中和在实体瘤患者的外周血中发现了癌细胞和免疫细胞融合在一起形成杂合体(杂合癌细胞)。与未发生融合的癌细胞相比，这些杂合癌细胞在体外具有更大的迁移和侵袭能力，并且当被注射到小鼠中时，与未融合的癌细胞相比，它们更容易发生转移。细胞融合的过程如图所示，请分析回答下列问题。

（1）若A细胞为小鼠黑色素瘤细胞，B细胞为小鼠巨噬细胞(免疫细胞的一种)，C为在小鼠体内形成的杂合癌细胞。研究发现C细胞比B细胞具有更大的迁移和侵袭能力，据此判断，C细胞表面糖蛋白可能比B细胞表面糖蛋白________，导致C细胞更易扩散和转移。A、B细胞在小鼠体内融合和体外融合的过程均体现了细胞膜具有__________________的结构特点。只是在体外融合过程中需诱导融合，常用的诱导因素有____________________等(至少写出两项)。
（2）若图表示制备单克隆抗体的过程，从A、B细胞到C细胞的过程中，所形成的C有_______种(只考虑两两融合),用特定的选择性培养基筛选后得到的D细胞是____________________，D细胞还需进行_________________________，才可获得能够分泌所需抗体的细胞。
（3）单克隆抗体的优点是_______________________。
（4）医疗上把单克隆抗体与化学药物或细胞毒素相结合制成“_____________”，借助抗体的定向作用将药物带到病变细胞并将其杀死。

请回答下面有关生物技术的相关问题：
(1) 要使人的药用蛋白基因在奶牛乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、____________________、终止子、______________等部分。
(2) 单克隆抗体的制备至少需要经过两次筛选，方法分别是__________和______________。
(3) 当在_____________________的间隙观察到两个极体，这是判断卵子是否受精的重要标志。哺乳动物早期胚胎在一定时间内不与母体子宫建立组织上的联系，这为________________提供了可能。在胚胎移植前对家畜胚胎进行性别鉴定，可取___________期的___________细胞做DNA分析。
(4) 某养殖户把自己的养鸡场、养猪场、鱼塘和桑园也纳入某一已经建好的生态园，并把很多单个生产系统优化整合到一起，改善了系统的功能，这体现了生态工程___________________原理。

EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体，科研人员用小鼠进行实验。
（1）将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2作为______分别注射到3组小鼠体内，引发小鼠机体的_______免疫，产生相应的抗体。
（2）多次免疫后，分别取上述3组小鼠的血清和未免疫小鼠血清，测定抗体与抗原的结合强度，结果如图所示。

①EV71免疫的小鼠血清抗体_______（填“是”或“不是”）单一抗体，判断依据是___________。
②测定各组小鼠血清与非EV71蛋白结合强度，目的是排除___________________的影响。
③制备抗EV71单克隆抗体时，选用_______免疫的小鼠脾脏细胞效果最佳，依据是___________________________________________。
（3）取相应免疫组小鼠的脾脏，剪碎并用________酶处理得到小鼠脾脏细胞，用灭活的病毒诱导，与________细胞融合，筛选获得5个不同的杂交瘤细胞株。
（4）为进一步研究抗体的作用效果，科研人员培养上述杂交瘤细胞株，获得5种单克隆抗体，分别将它们与等量EV71混合，加入到5组RD细胞（EV71的宿主细胞）中，测定______________，以分析抗体的作用效果。