利用现代生物技术可对生物进行改造。例如：
①从某细菌中获取抗虫基因，并与质粒运载体拼接成重组DNA，导入棉花的愈伤组织细胞内，经培养、筛选和培育获得抗虫棉品种；
②将人胰岛素基因与质粒运载体才并接成重组DNA，再导入某种细菌细胞内，大量培养该种细菌，以生产医用的人胰岛素；
③取某种植物花粉，先组织培养形成完整桂林，再用秋水仙素处理，使之染色体加倍；
④将大鼠的生长激素基因与质粒运载体拼接成重组DNA，注射入小鼠的受精卵内，体外培养该受精卵使之发育到一定的胚胎阶段后，移植入代孕小鼠体内，产生“超级小鼠”； 
⑤取转基因抗冻番茄叶片经组织培养，产生再生植株，达到快速繁殖抗冻番茄的目的。根据上述材料回答问题。
【小题1】上述例子中，用到基因工程技术的有____________（填序号）。目的基因除了人工合成外，
还可通过________方法获取，拼接重组DNA的步骤中，都需要用到限制性内切酶和____________酶。
【小题2】与杂交的方法相比用例③中方法得到纯合子所需时间____________（较短/较长/相同）；用例⑤中所用方法大量去繁殖抗冻番茄时，抗冻基因____（更容易/不容易/一样容易）丢失。
【小题3】上述例子中，需要用到植物组织培养技术的有____________（填序号），植物组织培养技术的基本原理是植物活细胞具有______。

利用相关工程技术可以获得抗黑腐病杂种黑芥-花椰菜植株，已知野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，而花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，技术人员用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力，再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，流程如下图。

据图回答下列问题：
（1）该过程用到的工程技术有_______________和_________________。
（2）过程①用____________酶去除植物细胞壁，过程②PEG的作用是_______________，经过②操作后，需筛选出融合的杂种细胞，显微镜下观察融合的活细胞中有供体的叶绿体存在可作为初步筛选杂种细胞的标志。
（3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是_____________。原生质体经过细胞壁再生，进而分裂和脱分化形成____________。
（4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和双亲植株的根尖，制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的_______________ ；对杂种植株进行______________接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。

将外源基因整合到叶绿体基因组中并成功表达，这就是叶绿体转基因技术，该技术能有效改良植物的品质。 请回答下列问题：
（1）若要在短时间内大量扩增外源基因，可采用PCR技术，该技术利用了_______________的原理。
（2）对大多数高等植物而言，与传统的细胞核转基因相比，叶绿体转基因更稳定，因其不会随_____(填
“花粉”或“卵细胞”)传给后代，从而保持了_________(填“父本”或“母本”)的遗传特性。
（3）利用_______________处理植物体细胞可得到原生质体，再通过_____________法将目的基因导入原生质体，当原生质体再长出__________________时，便可通过植物组织培养技术培养出相应的转基因幼苗。
（4）一个完整的基因表达载体应该包括启动子、_________________________________等，启动子位于基因的首端，它是____________________，有它才能启动基因转录。

关于菊花的组织培养，以下说法正确的是(　　)

A．材料的年龄、保存时间的长短等都会影响植物组织培养的效果

B．对菊花茎段进行组织培养，必须添加植物激素才能成功

C．外植体经过再分化形成愈伤组织

D．在试管苗进行大田移植前，不需要光照处理

下列有关细胞全能性的叙述，正确的是（   ）

A．克隆羊的诞生说明高度分化的动物细胞具有全能性

B．愈伤组织的形成说明高度分化的植物细胞具有全能性

C．组织培养繁育花卉所利用的原理是植物细胞具有全能性

D．用花粉培育成的植株高度不育，说明花粉细胞不具有全能性